Первичная обработка цельной крови
1. Забрать 9 мл крови в полипропиленовую пробирку объемом 10 или 15 мл, содержащую 1,1 мл антикоагулянта на основе K3EDTA.
2. Осторожно перемешать кровь с антикоагулянтом 10-кратным аккуратным переворачиванием. После этапа 2 допускается хранение пробы при комнатной температуре не более 1 ч.
3. Центрифугировать пробирку с кровью с ускорением 500 g в течение 15 мин при температуре +4°С.
4. Отобрать супернатант и перенести его в полипропиленовую пробирку объемом 5 мл или в 2-3 полипропиленовые пробирки объемом 2 мл.
5. Центрифугировать пробирку (пробирки) с супернатантом с ускорением 2 000 g в течение 15 минут при температуре +4°С.
6. Отобрать супернатант и перенести его в полипропиленовые пробирки объемом 2 или 1,5 мл, соблюдая при этом максимальную осторожность, чтобы не задеть осадок. Пробирки пометить «ПлН» (плазма крови неочищенная).
7. Осадок перенести в другую полипропиленовую пробирку объемом 2 или 1,5 мл. Пробирку пометить «Кл» (клетки крови).
8. Пробирки «ПлН» центрифугировать с ускорением 5 000 g в течение 15 минут при температуре +4°С. Пробирку «Кл» центрифугировать в микроцентрифуге с максимальным ускорением в течение 3 минут при комнатной температуре.
9. Из пробирок «ПлН» перенести супернатант в новые полипропиленовые пробирки объемом 1,5 мл, не захватывая нижнюю часть супернатанта. Новые пробирки пометить «ПлО» (плазма крови очищенная). Пробирки «ПлН» выбросить.
10. Из пробирки «Кл» отобрать супернатант и выбросить его.
Полученные образцы в пробирках «ПлО» и «Кл» представляют собой фракции плазмы и клеток крови, соответственно, и подлежат дальнейшему исследованию. Допускается хранение полученных образцов при температуре -80°С до 6 месяцев.
