Нанопоровое секвенирование плазмид

Преимущества секвенирования плазмид с использованием технологии определения последовательности ДНК третьего поколения (Nanopore):

  • Нет ограничений по длине прочтения;
  • Секвенирование не требует этапа ПЦР и подбора праймеров;
  • За один запуск можно получить точный сиквенс всей плазмиды;
  • Возможность секвенирования участков, недоступных для прочтения методом Сэнгера (например, последовательности AAV ITR, длинные повторы, «шпильки»).
ЗАКАЗ ON-LINE

Результаты

Результаты отправляются на электронную почту (в заявке можно указать несколько адресов) в виде ссылки на архив.

Для каждого образца будут переданы материалы:

  • Полный сиквенс плазмиды в формате .fasta;
  • График равномерности покрытия секвенирования (coverage plot) в формате .png;
  • Последовательность ДНК с оценкой точности (quality scores) для каждого нуклеотида в формате .fastq;
  • Отсортированные выровненные прочтения в формате .bam.

Дополнительная информация может быть предоставлена по запросу.

Пример результатов секвенирования
Скачать (zip)

Размещение заказа

Для оформления заказа, пожалуйста, заполните online-форму и приложите к образцам распечатанную заявку (файл для печати будет доступен на финальном этапе заполнения формы. После оформления заказа заявку также можно будет скачать на странице "История заказов").

КАТ.#СЕРВИСЦЕНА, РУБ.СРОК ВЫПОЛНЕНИЯ
Цены указаны с учетом НДС.
Стоимость доставки рассчитывается отдельно. Для заказов с суммой менее 10 тыс.руб. также отдельно рассчитывается стоимость оформления договора (заключается по запросу заказчика).
* Срок указан с момента запуска (выполняется 2 раза в месяц).
NPS01 Секвенирование плазмидной ДНК на основе технологии Nanopore 5 000 5–10 рабочих дней*
Дополнительные услуги
CS043 Наработка плазмидной ДНК, не менее 2 мкг (Miniprep) 3 000 +3 дня
Наработка плазмидной ДНК, не менее 50 мкг (Midiprep) 5 800 +5–10 дней

Критерии качества передаваемой плазмидной ДНК:

Для успешного выполнения работ передаваемая плазмида должна соответствовать следующим требованиям:

  • Соотношение 260/280: 1.8–2.0;
  • Соотношение 260/230: 2.0–2.2;
  • Концентрация: 100–500 нг/мкл;
  • Минимальный объем для плазмид длиной:
         <30 кб — 15 мкл;
         30–150 кб — 30 мкл;
         >150 кб — 50 мкл.
  • Целостность плазмиды и отсутствие РНК должны быть оценены по электрофорезу в агарозном геле.

Перед секвенированием мы бесплатно выполняем предварительный контроль качества присланной матрицы. При обнаружении отклонений выполнение заказа приостановливается для обсуждения всех деталей и рисков.

Выделение плазмидной ДНК производится только из образцов бактериального происхождения. Вы можете предоставить бактерии в агарозной среде на чашках или других носителях. Во избежание замораживания образцов с живыми бактериями указывайте на упаковке: "Хранение: +4 °С".
Пожалуйста, обратите внимание, что мы не принимаем условно-патогенные, патогенные организмы и организмы из неизвестных источников.

Отправка образцов

Возможные способы отправки образцов:
• передать с курьером;
• принести в любой пункт выдачи/приема заказов СДЭК;
• оставить на ресепшен Евроген по рабочим дням с 9:00 до 19:00.

Подробная информация о том, как нас найти представлена по ссылке.

Для оформления курьерской отправки образцов вы можете написать нам на sequence@evrogen.ru или
самостоятельно отправить образцы через СДЭК (курьером или принести в любой пункт выдачи/приема заказов).

Подробнее по СДЭК (развернуть)

Для оформления отправки через СДЭК за наш счет (с последующим добавлением цены доставки к стоимости заказа), пожалуйста, позвоните нашему менеджеру СДЭК:
+7 (929) 241-70-80, Александр Фролов
Режим работы: с 8:00 до 17:00 (Москва, UTC+3).
Список пунктов СДЭК

Отправляемые образцы утилизируются после выполнения работ и не подлежат возврату.

Ограничения метода

Несмотря на возможность прочтения сверхдлинных фрагментов, нанопоровое секвенирование имеет ограничения. В единичных случаях возможны ошибки при прохождении протяженных гомополимерных трактов и повторяющихся участков (например, одинаковых промоторов, экспрессионных кассет и т.д.).

Вниманию заказчика

В случае невозможности исполнения заказа, возникшей по вине заказчика (например, неверно предоставленной информации о нуклеотидной последовательности, присланных некачественных биологических материалах), произведенные услуги подлежат оплате в полном объеме.

Конфиденциальность

Евроген гарантирует сохранение конфиденциальности данных, полученных в процессе обсуждения и выполнения заказа.