HS Taq ДНК-полимераза

- "Горячий старт" в первом цикле денатурации
- Экзонуклеазная активность 5’ → 3’
- Размер ампликонов до 5 тыс. п.о.

HS Taq ДНК-полимераза представляет собой смесь рекомбинантного фермента Taq ДНК-полимеразы и моноклональных антител. Наличие "горячего старта" существенно повышает чувствительность и специфичность реакции по сравнению с Taq полимеразой. Область применения - Амплификация ДНК в рутинных аналитических исследованиях - Мультиплексная ПЦР - ПЦР в режиме реального времени (TaqMan, интеркалирующие красители)

HS Taq ДНК-полимераза неактивна в условиях приготовления реакционной смеси. Активация фермента происходит в течение первой денатурации. При температуре более +70 °С комплекс ДНК-полимеразы с антителом диссоциирует.

Полимераза комплектуется стандартным 10Х Taq буфером или высокоэффективным 10Х Taq Turbo буфером. При необходимости можно дополнительно заказать реакционный буфер без магния.

Длина фрагмента, который возможно амплифицировать с помощью HS Taq ДНК-полимеразы, зависит от природы и качества ДНК-матрицы. В оптимальных условиях она может достигать 5 тыс.п.о.

Амплифицированные продукты имеют на концах выступающие дезоксиаденозиновые остатки, что позволяет использовать ПЦР-продукт для клонирования в Т-векторы (pAL2-T или pKAN-T).

Основные свойства HS Taq ДНК-полимеразы

1. Быстрый "горячий старт" в первом цикле денатурации (95 °С, 5-10 сек)
2. Температурный оптимум активности 70-74 °С
3. 5’ → 3’ экзонуклеазная активность
4. Накопление продукта ПЦР происходит быстрее, по сравнению с химически модифицированными полимеразами
5. Возможность клонирования продуктов ПЦР в Т-векторы (pAL2-T или pKAN-T) за счет выступающих на концах амплифицированных фрагментов ДНК дезоксиаденозиновых остатков.

	Сравнение специфичности и эффективности амплификации геномной ДНК человека с помощью Taq ДНК -полимеразы и HS Taq ДНК -полимеразы. А - фрагмент гена KIR длиной 1600 п.о. Б - фрагмент LINE-последовательности длиной 240 п.о. 30 циклов ПЦР, 5 нг ДНК матрицы на старт. Дорожка М – маркер 1 kb DNA Ladder.

Подбор реакционного буфера

• Для большинства приложений ПЦР рекомендуется использовать Taq Turbo буфер (особенно в случае GC-богатых ампликонов). При необходимости оптимизировать концентрацию ионов магния в реакции, можно отдельно заказать Taq Turbo буфер без Mg²⁺.
• Применение стандартного Taq буфера допустимо, если увеличение эффективности ПЦР может привести к появлению неспецифического продукта, а также для реакций, в которых условия ПЦР были ранее оптимизированы под использование Taq буфера. При необходимости можно отдельно заказать Taq буфер без Mg²⁺.
• Более подробно о реакционных буферах: см. Буферы для Taq и HS Taq ДНК-полимераз.

Результат амплификации GC-богатого фрагмента плазмиды в Taq Turbo буфере (красным) и Taq буфере (зеленым). Длина фрагмента 490 п.о. Интеркалирующий краситель EvaGreen®. На старте ПЦР использовали 5, 0.5 и 0.05 нг плазмидной ДНК, 4 технических повторности каждой точки.

Результат амплификации фрагмента гена hGAPD (211 п.о.) с использованием TaqMan зонда в Taq буфере (синим) и Taq Turbo буфере (красным). На старте ПЦР использовали 50, 7 и 1 нг геномной ДНК.

ПРОДУКТ	КАТ.#	КОМПОНЕНТЫ НАБОРА	КОЛИЧЕСТВО	ЦЕНА, РУБ.	ИНСТРУКЦИЯ (PDF)
Цена действительна на территории РФ и не включает доставку, а также не включает затраты на оформление договора для заказов с суммой менее 10 тысяч рублей. Продукты предназначены только для научно-исследовательских работ. Продукты не предназначены для лечения или диагностики заболеваний.
HS Taq ДНК-полимераза	PK017S	HS Taq ДНК-полимераза (5 ед./мкл), 100 мкл 10X Taq Turbo буфер, 1.5 мл	400 р-ций по 25 мкл
	PK017L	HS Taq ДНК-полимераза (5 ед./мкл), 5 x 100 мкл 10X Taq Turbo буфер, 5 x 1.5 мл	2000 р-ций по 25 мкл
	PK017H	HS Taq ДНК-полимераза (5 ед./мкл), 10 x 100 мкл 10X Taq Turbo буфер, 10 x 1.5 мл	4000 р-ций по 25 мкл
	PK017B	HS Taq ДНК-полимераза Реакционный буфер	НА ЗАКАЗ*
HS Taq ДНК-полимераза + смесь dNTP	PK018	HS Taq ДНК-полимераза (5 ед./мкл), 5 x 100 мкл 10X Taq Turbo буфер, 5 x 1.5 мл 50X dNTP для ПЦР (10 мМ каждого), 5 x 200 мкл	2000 р-ций по 25 мкл

* Минимальный объем полимеразы, изготавливаемый по индивидуальному заказу: 5 мл, шаг – 1 мл

Возможно приобрести дополнительно

развернуть

ПРОДУКТ	КАТ.#	ОПИСАНИЕ	КОЛИЧЕСТВО	ЦЕНА, РУБ.	ИНСТРУКЦИЯ (PDF)
Цена действительна на территории РФ и не включает доставку, а также не включает затраты на оформление договора для заказов с суммой менее 10 тысяч рублей. Продукты предназначены только для научно-исследовательских работ. Продукты не предназначены для лечения или диагностики заболеваний.
Геномная ДНК человека	NA101	Геномная ДНК из клеточной линии человека Raji (концентрация 100 мкг/мл)	10 мкг, 100 мкл
Фрагментированная геномная ДНК человека	NA102	Фрагментированная геномная ДНК из клеточной линии человека Raji (концентрация 100 мкг/мл)	10 мкг, 100 мкл
MgCl2	PB005	Раствор MgCl2 (концентрация 50 мМ)	5 мл (5 x 1 мл)
Смесь dNTP (10 мM каждого)	PB006S	Смесь dNTP предназначена для использования в ПЦР, реакциях обратной транскрипции и любых других приложениях, требующих синтеза ДНК	200 мкл, 2 мкмоль
	PB006L		2 мл (10 x 200 мкл), 20 мкмоль
Смесь dNTP (2 мM каждого)	PB032		5 мл, (5 x 1 мл), 2 мкмоль
Набор dNTP (100 мM)	PB033	Набор dNTP состоит из 4-х пробирок высокоочищенных дезоксинуклеотидов (dATP, dTTP, dGTP, dCTP). Концентрация каждого — 100 мМ.	4 х 250 мкл, 25 мкмоль каждого
Вода деионизированная, свободная от нуклеаз Новинка!	PB207S	Деионизированная вода высокой очистки для подготовки реакционных смесей для ПЦР, реакциий обратной транскрипции, рестрикции, а также любых ферментативных реакций	7.5 мл (5 х 1.5 мл)
	PB207M		50 мл
	PB207L		1 л
50Х SYBR Green I для ПЦР-РВ	PB025S	Готовый к применению 50Х раствор для добавления в реакционную смесь для ПЦР с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ)	0.1 мл, 200 р-ций по 25 мкл
	PB025M		0.5 мл (5 х 0.1 мл), 1 000 р-ций по 25 мкл
10X Taq Turbo буфер	PB001	Высокоэффективные буферы для Taq и HS Taq ДНК-полимераз	3 000 р-ций объемом 25 мкл
10X Taq Turbo буфер (без Mg2+)	PB002		3 000 р-ций объемом 25 мкл
5X Taq Red буфер	PB003		1 500 р-ций объемом 25 мкл
5X Taq Red буфер (без Mg2+)	PB004		1 500 р-ций объемом 25 мкл