Полимеразы

HS Taq ДНК-полимераза

- "Горячий старт" в первом цикле денатурации
- Экзонуклеазная активность 5’ → 3’
- Размер ампликонов до 5 тыс. п.о.

HS Taq ДНК-полимераза представляет собой смесь рекомбинантного фермента Taq ДНК-полимеразы и моноклональных антител. Наличие "горячего старта" существенно повышает чувствительность и специфичность реакции по сравнению с Taq полимеразой.

Область применения

- Амплификация ДНК в рутинных аналитических исследованиях
- Мультиплексная ПЦР
- ПЦР в режиме реального времени (TaqMan, интеркалирующие красители)

HS Taq ДНК-полимераза неактивна в условиях приготовления реакционной смеси. Активация фермента происходит в течение первой денатурации. При температуре более +70 °С комплекс ДНК-полимеразы с антителом диссоциирует.

Полимераза комплектуется стандартным 10Х Taq буфером или высокоэффективным 10Х Taq Turbo буфером. При необходимости можно дополнительно заказать реакционный буфер без магния.

Длина фрагмента, который возможно амплифицировать с помощью HS Taq ДНК-полимеразы, зависит от природы и качества ДНК-матрицы. В оптимальных условиях она может достигать 5 тыс.п.о.

Амплифицированные продукты имеют на концах выступающие дезоксиаденозиновые остатки, что позволяет использовать ПЦР-продукт для клонирования в Т-векторы (pAL2-T или pKAN-T).

Основные свойства HS Taq ДНК-полимеразы

1. Быстрый "горячий старт" в первом цикле денатурации (95 °С, 5-10 сек)
2. Температурный оптимум активности 70-74 °С
3. 5’ → 3’ экзонуклеазная активность
4. Накопление продукта ПЦР происходит быстрее, по сравнению с химически модифицированными полимеразами
5. Возможность клонирования продуктов ПЦР в Т-векторы (pAL2-T или pKAN-T) за счет выступающих на концах амплифицированных фрагментов ДНК дезоксиаденозиновых остатков.

Сравнение специфичности и эффективности амплификации геномной ДНК человека с помощью Taq ДНК -полимеразы и HS Taq ДНК -полимеразы.

А - фрагмент гена KIR длиной 1600 п.о.
Б - фрагмент LINE-последовательности длиной 240 п.о.
30 циклов ПЦР, 5 нг ДНК матрицы на старт. Дорожка М – маркер 1 kb DNA Ladder.

Подбор реакционного буфера

  • Для большинства приложений ПЦР рекомендуется использовать Taq Turbo буфер (особенно в случае GC-богатых ампликонов). При необходимости оптимизировать концентрацию ионов магния в реакции, можно отдельно заказать Taq Turbo буфер без Mg2+.
  • Применение стандартного Taq буфера допустимо, если увеличение эффективности ПЦР может привести к появлению неспецифического продукта, а также для реакций, в которых условия ПЦР были ранее оптимизированы под использование Taq буфера. При необходимости можно отдельно заказать Taq буфер без Mg2+.
  • Более подробно о реакционных буферах: см. Буферы для Taq и HS Taq ДНК-полимераз.

Результат амплификации GC-богатого фрагмента плазмиды в Taq Turbo буфере (красным) и Taq буфере (зеленым).

Длина фрагмента 490 п.о. Интеркалирующий краситель EvaGreen®. На старте ПЦР использовали 5, 0.5 и 0.05 нг плазмидной ДНК, 4 технических повторности каждой точки.

Результат амплификации фрагмента гена hGAPD (211 п.о.) с использованием TaqMan зонда в Taq буфере (синим) и Taq Turbo буфере (красным).

На старте ПЦР использовали 50, 7 и 1 нг геномной ДНК.

ПРОДУКТ КАТ.# КОМПОНЕНТЫ НАБОРА КОЛИЧЕСТВО ЦЕНА, РУБ. ИНСТРУКЦИЯ (PDF)
Цена действительна на территории РФ и не включает доставку, а также не включает затраты на оформление договора для заказов с суммой менее 10 тысяч рублей. Продукты предназначены только для научно-исследовательских работ. Продукты не предназначены для лечения или диагностики заболеваний.
HS Taq ДНК-полимераза PK017S HS Taq ДНК-полимераза (5 ед./мкл), 100 мкл
10X Taq Turbo буфер, 1.5 мл
400 р-ций по 25 мкл
PK017L HS Taq ДНК-полимераза (5 ед./мкл), 5 x 100 мкл
10X Taq Turbo буфер, 5 x 1.5 мл
2000 р-ций по 25 мкл
PK017H HS Taq ДНК-полимераза (5 ед./мкл), 10 x 100 мкл
10X Taq Turbo буфер, 10 x 1.5 мл
4000 р-ций по 25 мкл
PK017B HS Taq ДНК-полимераза
Реакционный буфер
НА ЗАКАЗ*
HS Taq ДНК-полимераза
+ смесь dNTP
PK018 HS Taq ДНК-полимераза (5 ед./мкл), 5 x 100 мкл
10X Taq Turbo буфер, 5 x 1.5 мл
50X dNTP для ПЦР (10 мМ каждого), 5 x 200 мкл
2000 р-ций по 25 мкл

* Минимальный объем полимеразы, изготавливаемый по индивидуальному заказу: 5 мл, шаг – 1 мл

Транспортировка и хранение: –20 °С.
Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки 1 год со дня поставки.

Возможно приобрести дополнительно

развернуть
ПРОДУКТ КАТ.# ОПИСАНИЕ КОЛИЧЕСТВО ЦЕНА, РУБ. ИНСТРУКЦИЯ (PDF)
Цена действительна на территории РФ и не включает доставку, а также не включает затраты на оформление договора для заказов с суммой менее 10 тысяч рублей. Продукты предназначены только для научно-исследовательских работ. Продукты не предназначены для лечения или диагностики заболеваний.
Набор реактивов PCR control set PK104 Набор контрольных образцов для быстрой проверки активности ДНК-полимераз в ПЦР 100 р-ций по 25 мкл
Геномная ДНК человека NA101 Геномная ДНК из клеточной линии человека Raji (концентрация 100 мкг/мл) 10 мкг, 100 мкл
Фрагментированная геномная ДНК человека NA102 Фрагментированная геномная ДНК из клеточной линии человека Raji (концентрация 100 мкг/мл) 10 мкг, 100 мкл
MgCl2 PB005 Раствор MgCl2 (концентрация 50 мМ) 5 мл (5 x 1 мл)
Смесь dNTP
(10 мM каждого)
PB006S Смесь dNTP предназначена для использования в ПЦР, реакциях обратной транскрипции и любых других приложениях, требующих синтеза ДНК. 200 мкл, 2 мкмоль
PB006L 2 мл (10 x 200 мкл), 20 мкмоль
Смесь dNTP
(2 мM каждого)
PB032 5 мл, (5 x 1 мл), 2 мкмоль
Набор dNTP
(100 мM)
PB033 Набор dNTP состоит из 4-х пробирок высокоочищенных дезоксинуклеотидов (dATP, dTTP, dGTP, dCTP). Концентрация каждого - 100 мМ. 4 х 250 мкл, 25 мкмоль каждого
Стерильная вода PB007 Деионизованная вода для ПЦР, не содержит нуклеаз 7.5 мл (5 x 1.5 мл)
Вода деионизированная, свободная от нуклеаз
Новинка!
PB207M Деионизованная вода высокой очистки для подготовки реакционных смесей для ПЦР, реакциий обратной транскрипции, рестрикции, а также любых ферментативных реакций 50 мл
PB207L 1 л
50Х SYBR Green I
для ПЦР-РВ
PB025S Готовый к применению 50Х раствор для добавления в реакционную смесь для ПЦР с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ) 0.1 мл, 200 р-ций по 25 мкл
PB025M 0.5 мл (5 х 0.1 мл), 1000 р-ций по 25 мкл
10X Taq буфер PB008 Стандартные буферы для Taq и HS Taq ДНК-полимераз 7.5 мл (5 x 1.5 мл)
10X Taq буфер
(без Mg2+)
PB009 7.5 мл (5 x 1.5 мл)
10X Taq Turbo буфер PB001 Высокоэффективные буферы для Taq и HS Taq ДНК-полимераз 3000 р-ций объемом 25 мкл
10X Taq Turbo буфер
(без Mg2+)
PB002 3000 р-ций объемом 25 мкл
5X Taq Red буфер PB003 1500 р-ций объемом 25 мкл
5X Taq Red буфер
(без Mg2+)
PB004 1500 р-ций объемом 25 мкл