Tersus полимераза
Высокая точность синтеза ДНК
Высокая специфичность ПЦР
Эффективная амплификация сложных ДНК-матриц
Tersus полимераза — смесь термостабильных ДНК-полимераз с «горячим стартом» для высокоточной и специфичной амплификации фрагментов ДНК с широкого спектра матриц.
Полимераза поставляется с буфером 10X Tersus Plus, подходящим для большинства приложений, а также амплификации ДНК богатой GC-участками. В состав набора Tersus Plus PCR kit дополнительно входит окрашенный 5X Tersus Red буфер для проведения анализа ПЦР-продукта на агарозном геле без добавления специального буфера для нанесения проб, смесь dNTP (10 мМ каждого) и вода деионизированная, свободная от нуклеаз.
Высокая точность синтеза ДНК является главным свойством Tersus полимеразы. При использовании Tersus полимеразы для переклонирования фрагментов ДНК удается существенно снизить затраты по дальнейшему секвенированию при отборе клонов, не содержащих точечных замен.
Высокая специфичность Tersus полимеразы позволяет использовать ее при работе со сложными матрицами, например, при амплификации высокогомологичных повторов, фрагментов геномной ДНК или кДНК.
Основные характеристики
- Высокая точность синтеза.
- Амплификация фрагментов ДНК длиной до 10 т.п.о.
- Температурный оптимум активности: 70–74 °C.
- 5´→3´ ДНК-полимеразная активность.
- Отсутствие 5´→3´ экзонуклеазной активности.
- Корректирующая 3´→5´ экзонуклеазная активность.
- Быстрый "горячий старт" в первом цикле денатурации.
- Высокая специфичность амплификации.
- Возможность клонирования продуктов ПЦР в ТА-векторы (pAL2-T или pKAN-T).
Область применения
- Амплификация фрагментов ДНК для переклонирования.
- Сайт-направленный мутагенез.
- Амплификации ДНК-фрагментов для дальнейшего секвенирования.
- Высокоспецифичная ПЦР со сложных ДНК-матриц.
- ПЦР-РВ с интеркалирующими красителями (SYBR Green I и др.)
Tersus полимераза. Амплификация фрагментов ДНК фага λ различной длины.
Амплификацию фрагментов ДНК фага λ проводили с 10 нг ДНК-матрицы за 12 (дорожки 1, 3)
и 15 (дорожки 2, 4) циклов ПЦР:
1 – фрагмент 3 т.п.о.;
2 – фрагмент 5 т.п.о.;
3 – фрагмент 8 т.п.о.;
4 – фрагмент 10 т.п.о.;
М — маркер DNA Ladder 1 kb.
Не рекомендуется использование Tersus полимеразы для:
- Taq-Man ПЦР в реальном времени из-за отсутствия 5'→3'экзонуклеазной активности.
- SNP-детекции с помощью аллель-специфичной ПЦР из-за наличия 3'→5' экзонуклеазной (proofreading) активности.
- Для задач, предъявляющих повышенные требования к размеру амплифицированного продукта (например, для амплификации образцов кДНК), рекомендуется использовать Encyclo полимеразу.
- Для анализа точечных замен (SNP) с помощью аллель-специфичной ПЦР рекомендуется SNPdetect полимераза.
| Название | Компоненты набора | Инструкция | Кат. # | Количество | Цена, руб. |
|---|---|---|---|---|---|
| Набор Tersus Plus PCR kit | 50X смесь полимераз Tersus, 100 мкл | PK221 | 200 реакций объемом 25 мкл | 9 250 | |
| Tersus полимераза | 50X смесь полимераз Tersus, 100 мкл | PK123S | 200 реакций объемом 25 мкл | 8 350 | |
50X смесь полимераз Tersus, 5 x 100 мкл | PK123L | 1000 реакций объемом 25 мкл | 36 600 | ||
50X смесь полимераз Tersus | PK123B | 73 200 |
* Минимальный объем полимеразы, изготавливаемый по индивидуальному заказу: 5 мл, шаг – 1 мл
Транспортировка и хранение: –20 °С.
Срок годности: 12 месяцев с даты поставки при соблюдении условий хранения и транспортировки.
Связанные продукты
| Название | Описание | Инструкция | Кат. # | Количество | Цена, руб. |
|---|---|---|---|---|---|
| Геномная ДНК | |||||
| Геномная ДНК человека | Геномная ДНК из клеточной линии человека Raji, 100 мкг/мл. | NA101 | 10 мкг, 100 мкл | 4 000 | |
| Фрагментированная геномная ДНК человека | Фрагментированная геномная ДНК из клеточной линии человека Raji, 100 мкг/мл. | NA102 | 10 мкг, 100 мкл | 4 900 | |
| Геномная ДНК крысы | Геномная ДНК крысы из клеточной линии C6, 100 мкг/мл. | NA201 | 10 мкг, 100 мкл | 4 000 | |
| Буферы для ПЦР | |||||
| MgCl2 | Раствор MgCl2 (50 мМ) для индивидуального подбора концентрации ионов Mg2+ в реакции | PB005 | 5 мл (5 x 1 мл) | 700 | |
| 10X Tersus Plus буфер | 10X буферы для смеси полимераз Tersus. Для большинства приложений, в т.ч. ПЦР-РВ с интеркалирующими красителями | PB016 | 3 мл (5 x 0.6 мл) | 700 | |
| 10X Tersus Plus буфер (без Mg2+) | PB017 | 3 мл (5 x 0.6 мл) | 700 | ||
| 5X Tersus Red буфер | PB018 | 6 мл (5 x 1.2 мл) | 700 | ||
| dNTP | |||||
| Смесь dNTP (10 мМ каждого) | Смесь dNTP предназначена для использования в ПЦР, реакциях обратной транскрипции и любых других приложениях, требующих синтеза ДНК | PB006S | 200 мкл, 2 мкмоль | 850 | |
| PB006L | 2 мл (10 x 200 мкл), 20 мкмоль | 6 600 | |||
| Смесь dNTP (2 мМ каждого) | PB032 | 5 мл (5 х 1 мл), 10 мкмоль | 4 850 | ||
| Набор dNTP (100 мМ) | Набор из 4-х пробирок высокоочищенных дезоксинуклеотидов (dATP, dTTP, dGTP, dCTP). Концентрация каждого — 100 мМ | PB033 | 4 х 250 мкл, 25 мкмоль каждого | 5 500 | |
| Раствор dUTP (100 мМ) New | Для использования в ферментативных реакциях синтеза ДНК, где требуется полная или частичная замена dTTP (в том числе для контроля контаминации реакции) | PB034 | 100 мкл, 10 мкмоль | 700 | |
| Вода | |||||
| Вода деионизированная, свободная от нуклеаз | Вода высокой степени очистки | PB207S | 7.5 мл (5 х 1.5 мл) | 450 | |
| PB207M | 50 мл | 2 700 | |||
| PB207L | 1 л | 48 000 | |||
| Красители для ПЦР | |||||
| 50Х SYBR Green I для ПЦР-РВ | Готовый к применению 50Х раствор для добавления в реакционную смесь для ПЦР с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ) | PB025S | 0.1 мл, 200 реакций по 25 мкл | 1 700 | |
| PB025M | 0.5 мл (5 х 0.1 мл), 1 000 реакций по 25 мкл | 7 000 | |||