Векторы для клонирования pAL2-T и pKAN-T

- Быстрое клонирование продуктов ПЦР
- Высокая эффективность клонирования

- Сиквенс pAL2-T (txt)
- Сиквенс pKAN-T (txt)

Векторы pAL2-T и pKAN-T предназначены для быстрого клонирования продуктов ПЦР без предварительной обработки рестриктазами или экзонуклеазами.
Рекомендуемый размер вставки – до 1 500 п.о.

Каждый из векторов представляет собой линеаризованную плазмиду с выступающими фосфорилированными 3'-концевыми тимидинами. Эффективное лигирование ПЦР-продукта в вектор основано на способности Таq-полимеразы и ее аналогов нематрично добавлять на 3'-конец синтезированной цепи ДНК дезоксиаденозин. Таким образом, продукт ПЦР и вектор несут выступающие комплементарные 3'-концевые нуклеотиды А:Т. Наличие таких "липких" концов обеспечивает значительно более высокую эффективность лигирования по сравнению с лигированием "втупую".

Векторы несут гены устойчивости к антибиотикам:

  • pAL2-T – к ампициллину;
  • pKAN-T – к канамицину.

Различная устойчивость существенно облегчает переклонирование ампликонов и последующую работу с клонированными фрагментами ДНК. Возможность смены устойчивости к антибиотику (ампициллин на канамицин, и наоборот) позволяет исключить возможность роста колоний с исходной плазмидой, что упрощает манипуляции при переклонировании фрагментов из ТА-векторов в специализированные вектора. Отказ от обязательной в ряде случаев и трудоемкой стадии очистки продуктов ПЦР/рестрикции через агарозный гель сокращает время клонирования и уменьшает потери ДНК.

Основные свойства векторов pAL2-T и pKAN-T

1. Клонирование ПЦР-продуктов в вектор не требует дополнительной ферментативной обработки;
2. Вектор обеспечивает возможность бело-голубой селекции клонов (по результатам ПЦР-скрининга не менее 90% белых колоний содержат рекомбинантную плазмидную ДНК);
3. Вектор можно использовать для клонирования как индивидуальных ампликонов, так и сложных смесей (например, амплифицированных библиотек кДНК);
4. Возможен отбор рекомбинантных клонов путем ПЦР-скрининга бактериальных колоний с использованием стандартной пары праймеров;
5. Растворённый в воде вектор выдерживает не менее 10-15 циклов размораживания/замораживания без снижения эффективности клонирования.

A - Карта pAL2-T вектора, 3.0 т.п.н.
Б - Карта pKAN-T вектора, 2.95 т.п.н.

КАТ.# КОЛ-ВО КОМПОНЕНТЫ НАБОРА ЦЕНА, РУБ. ИНСТРУКЦИЯ (PDF)
Цена действительна на территории РФ и не включает доставку, а также не включает затраты на оформление договора для заказов с суммой менее 10 тысяч рублей. Продукты предназначены только для научно-исследовательских работ. Продукты не предназначены для лечения или диагностики заболеваний.
TA002 25 реакций pAL2-T вектор, лиофилизированный
TA003 25 реакций pKAN-T вектор, лиофилизированный

Хранение: -20 °С.
Транспортировка: комнатная температура.
Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки 1 год со дня поставки.