HS Taq ДНК-полимераза
"Горячий старт" в первом цикле денатурации
Экзонуклеазная активность 5’ → 3’
HS Taq ДНК-полимераза представляет собой смесь рекомбинантного фермента Taq ДНК-полимеразы и моноклональных антител.
HS Taq неактивна в условиях приготовления реакционной смеси. Активация фермента происходит в течение первой денатурации. При температуре более 70 °C комплекс ДНК-полимеразы с антителом диссоциирует. Наличие "горячего старта" существенно повышает чувствительность и специфичность реакции по сравнению c Taq полимеразой.
Основные характеристики
- Быстрый "горячий старт" в первом цикле денатурации.
- Увеличенная специфичность амплификации по сравнению с Taq ДНК-полимеразой без "горячего старта".
- Амплификация фрагментов ДНК длиной до 15 т.п.о.
- Температурный оптимум активности 70–74 °С.
- 5’→3’ экзонуклеазная активность.
- Отсутствует 3´→5´ экзонуклеазная активность (корректирующая).
- Возможность клонирования продуктов ПЦР в ТA-векторы (pAL2-T или pKAN-T).
Область применения
- Амплификация ДНК.
- ПЦР-РВ с TaqMan-зондами.
- ПЦР-РВ с интеркалирующими красителями (SYBR Green I и др.)
- ПЦР-скрининг.
- Мультиплексная ПЦР.
Сравнение специфичности и эффективности амплификации геномной ДНК человека с помощью Taq ДНК-полимеразы и HS Taq ДНК-полимеразы.
А — фрагмент гена KIR длиной 1600 п.о.
Б — фрагмент LINE-последовательности длиной 240 п.о.
30 циклов ПЦР, 5 нг ДНК-матрицы на старт.
М — маркер DNA Ladder 1 kb.
Подбор реакционного буфера
- 10Х Taq Turbo буфер, входящий в состав набора, подходит для использования в большинстве приложений ПЦР и ПЦР-РВ.
- При необходимости оптимизировать количество ионов магния в ПЦР-смеси, рекомендуется использовать буферы без Mg2+ и раствор MgCl2 (50 mM). Чтобы получить ПЦР-продукт для анализа на агарозном геле без добавления специального буфера для нанесения проб можно воспользоваться 5Х Taq Red буфером.
Более подробно о реакционных буферах: см. Буферы для Taq и HS Taq ДНК-полимераз.
| Название | Компоненты набора | Инструкция | Кат. # | Количество | Цена, руб. |
|---|---|---|---|---|---|
| HS Taq ДНК-полимераза | HS Taq ДНК-полимераза (5 ед./мкл), 100 мкл | PK017S | 400 реакций по 25 мкл | 1 800 | |
HS Taq ДНК-полимераза (5 ед./мкл), 5 x 100 мкл | PK017L | 2000 реакций по 25 мкл | 8 250 | ||
HS Taq ДНК-полимераза (5 ед./мкл), 10 x 100 мкл | PK017H | 4000 реакций по 25 мкл | 14 400 | ||
HS Taq ДНК-полимераза | PK017B | 16 500 | |||
| HS Taq ДНК-полимераза + смесь dNTP | HS Taq ДНК-полимераза (5 ед./мкл), 5 x 100 мкл | PK018 | 2000 реакций по 25 мкл | 10 900 |
* Минимальный объем полимеразы, изготавливаемый по индивидуальному заказу: 5 мл, шаг – 1 мл
Транспортировка и хранение: –20 °С.
Срок годности: 12 месяцев с даты поставки при соблюдении условий хранения и транспортировки.
Связанные продукты
| Название | Описание | Инструкция | Кат. # | Количество | Цена, руб. |
|---|---|---|---|---|---|
| Геномная ДНК | |||||
| Геномная ДНК человека | Геномная ДНК из клеточной линии человека Raji, 100 мкг/мл. | NA101 | 10 мкг, 100 мкл | 4 000 | |
| Фрагментированная геномная ДНК человека | Фрагментированная геномная ДНК из клеточной линии человека Raji, 100 мкг/мл. | NA102 | 10 мкг, 100 мкл | 4 900 | |
| Геномная ДНК крысы | Геномная ДНК крысы из клеточной линии C6, 100 мкг/мл. | NA201 | 10 мкг, 100 мкл | 4 000 | |
| Буферы для ПЦР | |||||
| MgCl2 | Раствор MgCl2 (50 мМ) для индивидуального подбора концентрации ионов Mg2+ в реакции | PB005 | 5 мл (5 x 1 мл) | 700 | |
| 10X Taq Turbo буфер | 10X буферы для Taq и HS Taq ДНК-полимераз. Обеспечивают повышенную эффективность ПЦР по сравнению со стандартным буфером | PB001 | 3 000 реакций объемом 25 мкл | 700 | |
| 10X Taq Turbo буфер (без Mg2+) | PB002 | 3 000 реакций объемом 25 мкл | 700 | ||
| 5X Taq Red буфер | PB003 | 1 500 реакций объемом 25 мкл | 700 | ||
| 5X Taq Red буфер (без Mg2+) | PB004 | 1 500 реакций объемом 25 мкл | 700 | ||
| dNTP | |||||
| Смесь dNTP (10 мМ каждого) | Смесь dNTP предназначена для использования в ПЦР, реакциях обратной транскрипции и любых других приложениях, требующих синтеза ДНК | PB006S | 200 мкл, 2 мкмоль | 850 | |
| PB006L | 2 мл (10 x 200 мкл), 20 мкмоль | 6 600 | |||
| Смесь dNTP (2 мМ каждого) | PB032 | 5 мл (5 х 1 мл), 10 мкмоль | 4 850 | ||
| Набор dNTP (100 мМ) | Набор из 4-х пробирок высокоочищенных дезоксинуклеотидов (dATP, dTTP, dGTP, dCTP). Концентрация каждого — 100 мМ | PB033 | 4 х 250 мкл, 25 мкмоль каждого | 5 500 | |
| Раствор dUTP (100 мМ) New | Для использования в ферментативных реакциях синтеза ДНК, где требуется полная или частичная замена dTTP (в том числе для контроля контаминации реакции) | PB034 | 100 мкл, 10 мкмоль | 700 | |
| Вода | |||||
| Вода деионизированная, свободная от нуклеаз | Вода высокой степени очистки | PB207S | 7.5 мл (5 х 1.5 мл) | 450 | |
| PB207M | 50 мл | 2 700 | |||
| PB207L | 1 л | 48 000 | |||
| Красители для ПЦР | |||||
| 50Х SYBR Green I для ПЦР-РВ | Готовый к применению 50Х раствор для добавления в реакционную смесь для ПЦР с детекцией в режиме реального времени (ПЦР-РВ) | PB025S | 0.1 мл, 200 реакций по 25 мкл | 1 700 | |
| PB025M | 0.5 мл (5 х 0.1 мл), 1 000 реакций по 25 мкл | 7 000 | |||