Готовые смеси для ПЦР 5X qPCRmix-HS c красителями SYBR и ROX
5X готовые реакционные смеси для ПЦР с красителем SYBR Green I и референсным красителем ROX
Горячий старт в первом цикле денатурации
Реакционные смеси 5X qPCRmix-HS SYBR+HighROX и 5X qPCRmix-HS SYBR+LowROX предназначены для высокоспецифичной ПЦР в реальном времени с интеркалирующим красителем SYBR Green I и референсным красителем ROX. Пассивный референсный краситель ROX обеспечивает нормирование сигналов репортерной флуоресценции, что позволяет корректировать флуктуацию сигналов между пробами в пределах эксперимента.
Смесь 5X qPCRmix-HS SYBR+HighROX подходит для Real-Time амплификаторов, требующих высокой концентрации красителя ROX в реакции (например, StepOne, StepOne Plus).
Смесь 5X qPCRmix-HS SYBR+LowROX подходит для Real-Time амплификаторов, требующих низкой концентрации красителя ROX в реакции (например, ABI 7500).
В состав смесей 5X qPCRmix-HS SYBR+HighROX и 5X qPCRmix-HS SYBR+LowROX входят следующие компоненты: HS Taq ДНК полимераза, краситель SYBR Green I, референсный краситель ROX, смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов, Mg2+, реакционный буфер. Для постановки реакции ПЦР в смесь требуется добавить праймеры, матрицу ДНК и воду.
Реакционный буфер оптимизирован для специфичной работы HS Taq ДНК полимеразы, а также для длительного хранения и многократного замораживания-размораживания смеси. Концентрация ионов магния в 1X реакционной смеси – 3 мМ, концентрация каждого дезоксинуклеозидтрифосфата – 0.12 мМ.
Преимущества использования
- Смесь оптимизирована для постановки ПЦР с SYBR Green I и позволяет получать результаты со значительным превышением уровня сигнала над фоновой флуоресценцией и низким порогом насыщения реакции (cycle threshold, Ct).
- Краситель ROX позволяет нормировать сигнал репортерной флуоресценции.
- Сокращается время на подготовку реакции.
- Снижается вероятность контаминации при смешивании компонентов ПЦР.
- Стандартизируются условия постановки однотипных реакций (снижается погрешность при смешивании компонентов ПЦР в разных экспериментах).
- Горячий старт ПЦР повышает специфичность реакции.
Спектр возбуждения и испускания флуоресценции ROX в реакционном буфере для амплификации, pH 8.0.
Ограничения к использованию
- Смеси не рекомендуется использовать для прямой амплификации с крови.
- Смеси не рекомендуется использовать для ампликонов длиной свыше 1 т.п.о. Для амплификации длинных фрагментов ДНК рекомендуется использовать Encyclo полимеразу.
* Минимальный объем смеси, изготавливаемый по индивидуальному заказу: 20 мл, шаг – 1 мл.
Хранение: –20 °С.
Число циклов замораживания/размораживания: не более 50.
Срок годности: 12 месяцев с даты поставки при соблюдении условий хранения и транспортировки.