Mint: обратная транскриптаза и наборы реактивов

- Приготовление кДНК для широкого круга задач, в т.ч. высокоэффективного секвенирования
- С малых стартовых количеств РНК
- кДНК обогащена полноразмерными последовательностями

- Цитирование - Описание технологии синтеза кДНК (англ.)

Обратная транскриптаза Mint (Mint ревертаза) - РНК-зависимая ДНК полимераза, предназначенная для синтеза первой цепи кДНК с одноцепочечной РНК матрицы. Особенностью Mint-ревертазы является ее способность после завершения синтеза молекулы кДНК нематрично присоединять к ее 3'-концу 3-5 дезоксинуклеотидов (преимущественно C), что позволяет использовать ее для синтеза полноразмерных библиотек кДНК и клонирования 5'-концов кДНК (5'-RACE). Основные свойства Mint ревертазы: 1. Лишена РНКазной активности 2. Обладает повышенной термической стабильностью (42-45°С) 3. Обеспечивает высокий выход кДНК 4. Обладает высокой процессивностью (синтезирует кДНК длиной до 7.5 т.п.о.)

Mint ревертаза входит в состав наборов реактивов Mint (кат.# SK001) и Mint-2 (кат.# SK005), предназначенных для приготовления двухцепочечной амплифицированной кДНК, обогащенной полноразмерными последовательностями, на основе тотальной или полиА+ РНК.

Наборы Mint и Mint-2 основаны на методе синтеза кДНК со сменой матрицы (SMART) . Получаемая кДНК обогащена полноразмерными последовательностями и содержит известные последовательности адаптеров на обоих концах. Процедура синтеза занимает 6-8 часов. Минимальное стартовое количество РНК для синтеза первой цепи кДНК составляет 250 нг тотальной или 100 нг полиА+ РНК. Для достижения наилучшего результата рекомендуется использовать 1- 2 мкг тотальной РНК или 0,5-1 мкг полиА+ РНК.

кДНК, полученная с помощью технологии Mint на основе тотальной РНК из различных источников: (1) печень мыши; (2) скелетная мышца мыши; (3) мозг мыши; (4) лейкоциты человека; (5) легкое человека; (6) скелетная мышца человека; (7) личинка москита; (8) копепода Pontella sp.; (9) помидор Lycopersicon esculentum. М – маркер 1 kb DNA Ladder.

кДНК, полученная с помощью набора Mint, может быть использована для приготовления ненаправленных библиотек кДНК, супрессионной вычитающей гибридизации (SSH), нормализации с помощью набора реактивов Trimmer-2 , быстрой амплификации 3'- и 5'-концевых фрагментов полноразмерных транскриптов (RACE) и других приложений.

Набор Mint-2 содержит дополнительные адаптеры, позволяющие приготовить кДНК, оптимальную для последующего секвенирования на платформах Roche/454, ABI/SOLiD или Illumina/Solexa и для направленного клонирования библиотек кДНК.

ПРОДУКТ	КАТ.#	КОМПОНЕНТЫ НАБОРА	КОЛИЧЕСТВО	ЦЕНА, РУБ.	ИНСТРУКЦИЯ (PDF)
Цена действительна на территории Российской Федерации и не включает доставку. Цена у дистрибьюторов может отличаться от приведенной на сайте. Продукт предназначен для научно-исследовательских работ, осуществляемых квалифицированным персоналом. Продукт не предназначен для лечения и диагностики заболеваний.
Обратная транскриптаза Mint	SK003	Mint-ревертаза, 100 мкл (200 ед./мкл) 5х Mint буфер, 220 мкл DTT (20 мМ), 110 мкл Смесь dNTP (10 мМ каждого), 120 мкл Вода для ПЦР, 1.5 мл	20000 ед. 100 р-ций объемом 10 мкл или 50 р-ций объемом 20 мкл
Набор для синтеза кДНК Mint	SK001	Mint ревертаза, 20 мкл (200 ед./мкл) 5х Mint буфер, 80 мкл DTT (20 мМ), 30 мкл Смесь dNTP (10 мМ каждого), 80 мкл PlugOligo адаптер (15 мкМ), 25 мкл 3'-праймер (10 мкМ), 25 мкл IP смесь, 130 мкл Контрольная тотальная РНК (0.5 мкг/мкл), 15 мкл ПЦР праймер М1 (10 мкМ), 100 мкл 50X смесь полимераз Encyclo, 50 мкл 10X Encyclo буфер, 300 мкл Вода для ПЦР, 1.5 мл	20 р-ций объемом 10 мкл
Набор для синтеза кДНК Mint-2	SK005	Mint ревертаза, 20 мкл (200 ед./мкл) 5X Mint буфер, 80 мкл DTT (20 мМ), 30 мкл Смесь dNTP (10 мМ каждого), 120 мкл Смесь праймеров 454 PCR Primer mix (10 мМ каждого), 100 мкл PlugOligo-1 адаптер ( 15 мкМ ), 25 мкл PlugOligo-3M адаптер ( 15 мкМ ), 25 мкл CDS-1 адаптер ( 10 мкМ ), 25 мкл CDS-Gsu адаптер ( 10 мкМ ), 25 мкл CDS-4M адаптер ( 10 мкМ ), 25 мкл IP смесь, 130 мкл Контрольная тотальная РНК (0,35 мкг/мкл), 30 мкл ПЦР праймер М1 ( 10 мкМ ), 150 мкл 50X смесь полимераз Encyclo, 100 мкл 10X Encyclo буфер, 600 мкл Вода для ПЦР, 2 x 1.5 мл	20 р-ций объемом 10 мкл

Хранение: -20 °С
Транспортировка: -70 °С или -20 °С
Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки 1 год со дня поставки.

Возможно приобрести дополнительно

ПРОДУКТ	КАТ.#	ОПИСАНИЕ	КОЛ-ВО	ЦЕНА, РУБ.	ИНСТРУКЦИЯ (PDF)
Цена действительна на территории Российской Федерации и не включает доставку. Цена у дистрибьюторов может отличаться от приведенной на сайте. Продукт предназначен для научно-исследовательских работ, осуществляемых квалифицированным персоналом. Продукт не предназначен для лечения и диагностики заболеваний.
Смесь dNTP (10 мM каждого)	PB006S	Смесь dNTP предназначена для использования в ПЦР, реакциях обратной транскрипции и любых других приложениях, требующих синтеза ДНК.	200 мкл, 2 мкмоль
	PB006L		2 мл (10 x 200 мкл), 20 мкмоль
Смесь dNTP (2 мM каждого) Новинка!	PB032		5 мл (5 x 1 мл), 2 мкмоль
Набор dNTP (100 мM) Новинка!	PB033	Набор dNTP состоит из 4-х пробирок высокоочищенных дезоксинуклеотидов (dATP, dTTP, dGTP, dCTP). Концентрация каждого - 100 мМ.	4 х 250 мкл, 25 мкмоль каждого
Стерильная вода	PB007	Деионизованная вода для ПЦР, не содержит нуклеаз	7.5 мл (5 x 1.5 мл)
Вода деионизированная, свободная от нуклеаз Новинка!	PB207	Деионизованная вода высокой очистки для подготовки реакционных смесей для ПЦР, реакциий обратной транскрипции, рестрикции, а также любых ферментативных реакций	50 мл
Encyclo буфер	PB010	Реакционный буфер для работы со смесью полимераз Encyclo	3 мл (5 x 0.6 мл)
Oligo(dT)15 праймер	SB001	Олиго(dT)15 праймер (концентрация 20 мкМ)	250 мкл (5 x 50 мкл), 5 нмоль
Random(dN)10 праймер	SB002	Случайный декануклеотидный праймер (концентрация 20мкМ)	250 мкл (5 x 50 мкл), 5 нмоль
Буфер для синтеза первой цепи кДНК	SB003	Реакционный буфер для MMLV ревертазы и Mint ревертазы	1.8 мл
Раствор DTT (дитиотреитола)	SB004	Раствор DTT (концентрация 20 мМ)	1 мл