Mint: обратная транскриптаза и наборы реактивов

- Приготовление кДНК для широкого круга задач, в т.ч. высокоэффективного секвенирования
- С малых стартовых количеств РНК
- кДНК обогащена полноразмерными последовательностями

- Цитирование
- Описание технологии
синтеза кДНК (англ.)

Обратная транскриптаза Mint (Mint ревертаза) - РНК-зависимая ДНК полимераза, предназначенная для синтеза первой цепи кДНК с одноцепочечной РНК матрицы. Особенностью Mint-ревертазы является ее способность после завершения синтеза молекулы кДНК нематрично присоединять к ее 3'-концу 3-5 дезоксинуклеотидов (преимущественно C), что позволяет использовать ее для синтеза полноразмерных библиотек кДНК и клонирования 5'-концов кДНК (5'-RACE).

Основные свойства Mint ревертазы:

1. Лишена РНКазной активности
2. Обладает повышенной термической стабильностью (42-45°С)
3. Обеспечивает высокий выход кДНК
4. Обладает высокой процессивностью (синтезирует кДНК длиной до 7.5 т.п.о.)

Mint ревертаза входит в состав наборов реактивов Mint (кат.# SK001) и Mint-2 (кат.# SK005), предназначенных для приготовления двухцепочечной амплифицированной кДНК, обогащенной полноразмерными последовательностями, на основе тотальной или полиА+ РНК.

Наборы Mint и Mint-2 основаны на методе синтеза кДНК со сменой матрицы (SMART) . Получаемая кДНК обогащена полноразмерными последовательностями и содержит известные последовательности адаптеров на обоих концах. Процедура синтеза занимает 6-8 часов. Минимальное стартовое количество РНК для синтеза первой цепи кДНК составляет 250 нг тотальной или 100 нг полиА+ РНК. Для достижения наилучшего результата рекомендуется использовать 1- 2 мкг тотальной РНК или 0,5-1 мкг полиА+ РНК.

кДНК, полученная с помощью технологии Mint на основе тотальной РНК из различных источников:

(1) печень мыши; (2) скелетная мышца мыши; (3) мозг мыши; (4) лейкоциты человека; (5) легкое человека; (6) скелетная мышца человека; (7) личинка москита; (8) копепода Pontella sp.; (9) помидор Lycopersicon esculentum. М – маркер 1 kb DNA Ladder.

кДНК, полученная с помощью набора Mint, может быть использована для приготовления ненаправленных библиотек кДНК, супрессионной вычитающей гибридизации (SSH), нормализации с помощью набора реактивов Trimmer-2 , быстрой амплификации 3'- и 5'-концевых фрагментов полноразмерных транскриптов (RACE) и других приложений.

Набор Mint-2 содержит дополнительные адаптеры, позволяющие приготовить кДНК, оптимальную для последующего секвенирования на платформах Roche/454, ABI/SOLiD или Illumina/Solexa и для направленного клонирования библиотек кДНК.

ПРОДУКТ КАТ.# КОМПОНЕНТЫ НАБОРА КОЛИЧЕСТВО ЦЕНА, РУБ. ИНСТРУКЦИЯ (PDF)
Цена действительна на территории РФ и не включает доставку, а также не включает затраты на оформление договора для заказов с суммой менее 10 тысяч рублей. Продукты предназначены только для научно-исследовательских работ. Продукты не предназначены для лечения или диагностики заболеваний.
Обратная транскриптаза Mint SK003 Mint-ревертаза, 100 мкл (200 ед./мкл)
5х Mint буфер, 220 мкл
DTT (20 мМ), 110 мкл
Смесь dNTP (10 мМ каждого), 120 мкл
Вода для ПЦР, 1.5 мл
20000 ед.
100 р-ций объемом 10 мкл
или 50 р-ций объемом 20 мкл
Набор для синтеза кДНК Mint SK001 Mint ревертаза, 20 мкл (200 ед./мкл)
5х Mint буфер, 80 мкл
DTT (20 мМ), 30 мкл
Смесь dNTP (10 мМ каждого), 80 мкл
PlugOligo адаптер (15 мкМ), 25 мкл
3'-праймер (10 мкМ), 25 мкл
IP смесь, 130 мкл
Контрольная тотальная РНК (0.5 мкг/мкл), 15 мкл
ПЦР праймер М1 (10 мкМ), 100 мкл
50X смесь полимераз Encyclo, 50 мкл
10X Encyclo буфер, 300 мкл
Вода для ПЦР, 1.5 мл
20 р-ций
объемом 10 мкл
Набор для синтеза кДНК Mint-2 SK005 Mint ревертаза, 20 мкл (200 ед./мкл)
5X Mint буфер, 80 мкл
DTT (20 мМ), 30 мкл
Смесь dNTP (10 мМ каждого), 120 мкл
Смесь праймеров 454 PCR Primer mix (10 мМ каждого), 100 мкл
PlugOligo-1 адаптер (15 мкМ), 25 мкл
PlugOligo-3M адаптер (15 мкМ), 25 мкл
CDS-1 адаптер (10 мкМ), 25 мкл
CDS-Gsu адаптер (10 мкМ), 25 мкл
CDS-4M адаптер (10 мкМ), 25 мкл
IP смесь, 130 мкл
Контрольная тотальная РНК (0,35 мкг/мкл), 30 мкл
ПЦР праймер М1 (10 мкМ), 150 мкл
50X смесь полимераз Encyclo, 100 мкл
10X Encyclo буфер, 600 мкл
Вода для ПЦР, 2 x 1.5 мл
20 р-ций
объемом 10 мкл

Хранение: -20 °С
Транспортировка: -70 °С или -20 °С
Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки 1 год со дня поставки.

Возможно приобрести дополнительно

развернуть
ПРОДУКТ КАТ.# ОПИСАНИЕ КОЛ-ВО ЦЕНА, РУБ. ИНСТРУКЦИЯ (PDF)
Цена действительна на территории РФ и не включает доставку, а также не включает затраты на оформление договора для заказов с суммой менее 10 тысяч рублей. Продукты предназначены только для научно-исследовательских работ. Продукты не предназначены для лечения или диагностики заболеваний.
Смесь dNTP
(10 мM каждого)
PB006S Смесь dNTP предназначена для использования в ПЦР, реакциях обратной транскрипции и любых других приложениях, требующих синтеза ДНК. 200 мкл, 2 мкмоль
PB006L 2 мл (10 x 200 мкл), 20 мкмоль
Смесь dNTP
(2 мM каждого)
PB032 5 мл (5 x 1 мл), 2 мкмоль
Набор dNTP
(100 мM)
PB033 Набор dNTP состоит из 4-х пробирок высокоочищенных дезоксинуклеотидов (dATP, dTTP, dGTP, dCTP). Концентрация каждого - 100 мМ. 4 х 250 мкл, 25 мкмоль каждого
Стерильная вода PB007 Деионизованная вода для ПЦР, не содержит нуклеаз 7.5 мл (5 x 1.5 мл)
Вода деионизированная, свободная от нуклеаз
Новинка!
PB207M Деионизованная вода высокой очистки для подготовки реакционных смесей для ПЦР, реакциий обратной транскрипции, рестрикции, а также любых ферментативных реакций 50 мл
PB207L 1 л
Encyclo буфер PB010 Реакционный буфер для работы со смесью полимераз Encyclo 3 мл (5 x 0.6 мл)
Oligo(dT)15 праймер SB001 Олиго(dT)15 праймер (концентрация 20 мкМ) 250 мкл (5 x 50 мкл), 5 нмоль
Random(dN)10 праймер SB002 Случайный декануклеотидный праймер
(концентрация 20мкМ)
250 мкл (5 x 50 мкл), 5 нмоль
Буфер для синтеза первой цепи кДНК SB003 Реакционный буфер для MMLV ревертазы и Mint ревертазы 1.8 мл
Раствор DTT (дитиотреитола) SB004 Раствор DTT (концентрация 20 мМ) 1 мл