Реактивы для синтеза кДНК
Синтез первой цепи кДНК
Синтез одноцепочечной комплементарной ДНК на матрице РНК возможен благодаря работе РНК-зависимых ДНК-полимераз, которые также называют обратные транскриптазы или ревертазы. Обратные транскриптазы обнаружены у эукариот, прокариот и ретровирусов.
Ключевая ценность метода обратной транскрипции заключается в том, что он позволяет изучать популяцию РНК в клетке путем перевода ее в более стабильную форму в виде ДНК. Рутинные методы работы с ДНК (ПЦР, ПЦР-РВ, клонирование, секвенирование и др.) позволяют исследовать экспрессию целевых генов, определять нуклеотидные последовательности генов, исследовать сплайсинг, регуляцию работы генов и многие другие процессы, в которых ключевая роль отведена РНК.
Обратная транскриптаза MMLV — ревертаза дикого типа вируса лейкемии мышей MMLV, продукт гена pol MMLV, обладает слабой активностью РНКазы H.
Обратные транскриптазы Mint и Magnus — модифицированные ревертазы MMLV, обладающие повышенной термостабильностью и лишенные активности РНКазы H.
Для подбора обратной транскриптазы, подходящей для вашего исследования, воспользуйтесь таблицей:
| ПРОДУКТ | КАТ.# | ТЕРМИНАЛЬНАЯ ТРАНСФЕРАЗНАЯ АКТИВНОСТЬ | ДЛИНА кДНК | ВРЕМЯ РЕАКЦИИ | КОЛ-ВО РЕАКЦИЙ | ЦЕНА, РУБ. | ИНСТРУКЦИЯ (PDF) |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Обратная транскриптаза MMLV | SK022S | — | до 8 т.п.о. | 60 мин | 100–200 |  | |
| SK022L | 500–1000 | ||||||
| SK021 | 50 | | |||||
| Обратная транскриптаза Mint | SK003 | ✔ | 60 мин | 50–100 | | ||
| Обратная транскриптаза Magnus Новинка! | SK006S | — | 15 мин | 50–100 | | SK006M | 250–500 |
Обратная транскрипция и амплификация кДНК
Одноцепочечная кДНК, растворенная в реакционной смеси, сохраняется недолго: ее желательно использовать в дальнейшей работе как можно быстрее. В зависимости от цели и возможностей исследователя существуют различные подходы для получения амплифицированной кДНК:
- – синтез первой цепи кДНК и амплификация интересующего фрагмента кДНК в одной пробирке (одна стадия);
– синтез первой цепи кДНК, затем амплификация интересующего фрагмента в другой пробирке (две стадии);
– синтез первой цепи, затем амплификация кДНК целиком - с созданием библиотеки кДНК
(две или три стадии, в зависимости от дальнейшего применения библиотеки).
Обратная транскрипция и амплификация
кДНК: в одну или в две стадии? (pdf)
Синтез первой цепи и создание полноразмерных библиотек кДНК
| ПРОДУКТ | КАТ.# | ПРИГОТОВЛЕНИЕ ПОЛНОРАЗМЕРНЫХ БИБЛИОТЕК | НАПРАВЛЕННОЕ КЛОНИРОВАНИЕ БИБЛИОТЕК | ТИП РНК-МАТРИЦЫ | КОЛ-ВО РЕАКЦИЙ | ЦЕНА, РУБ. | ИНСТРУКЦИЯ (PDF) |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Набор Mint kit | SK001 | ✔ | — | поли(А) или тотальная РНК | 20 | | |
| SK005 | ✔ | ✔ | поли(А) или тотальная РНК | 20 | | ||
Синтез первой цепи и амплификация "в одной пробирке"
| ПРОДУКТ | КАТ.# | СПОСОБ ДЕТЕКЦИИ | КОЛ-ВО РЕАКЦИЙ | ЦЕНА, РУБ. | ИНСТРУКЦИЯ (PDF) | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
Цена действительна на территории РФ и не включает доставку, а также не включает затраты на оформление договора для
заказов с суммой менее 10 тысяч рублей. Продукты предназначены только для научно-исследовательских работ. Продукты
не предназначены для лечения или диагностики заболеваний.
| |||||||
| Набор OneTube
| SK031S | Флуоресцентные зонды типа TaqMan | 100 | | |||
| SK031M | 500 | ||||||
| Набор OneTube
| SK032S | Интеркалирующий краситель
(входит в состав смеси) | 100 | | |||
| SK032M | 500 | ||||||
| Смесь OneTube
Новинка! | SK101S | Флуоресцентные зонды типа TaqMan или интеркалирующие красители | 100 | | |||
| SK101M | 500 | ||||||
Возможно приобрести дополнительно
Связанные продукты
