Фотосенсибилизатор KillerOrange
Генетически-кодируемый фотосенсибилизатор
Производство активных форм кислорода при облучении синим или зеленым светом
KillerOrange является мутантом KillerRed с яркой оранжевой флуоресценцией (максимум возбуждения при 512 нм и максимум эмиссии при 555 нм) [Sarkisyan et al., 2015]. В отличии от KillerRed, который становится фототоксичным при облучении зеленым или оранжевым (540-590 нм) светом, KillerOrange проявляет фототоксичность при облучении синим или зеленым (450-540 нм) светом.
Смещенный в синюю область спектр KillerOrange делает его потенциально более подходящим для двухфотонной микроскопии, чем родительский KillerRed. Кроме того, значительный Стоксов сдвиг (более 40 нм) может позволить спектрально разделять флуоресценцию KillerOrange от циановых и зеленых флуоресцентных белков при одновременном их возбуждении синим светом. Таким образом, возможно использовать циановые и зеленые индикаторы для наблюдения фототоксичных эффектов в реальном времени без необходимости изменения возбуждающего света.
Пара KillerRed-KillerOrange может быть использована для независимого уничтожения двух клеточных популяций; также эта пара потенциально может позволить ортогональный оптический контроль распространения сигнальных каскадов. Тандемные слитные конструкции KillerOrange-KillerRed или сочетание различных фотосенсибилизаторов в одной кассете могут усилить фототоксический эффект при облучении белым светом.
Таблица основных свойств
ХАРАКТЕРИСТИКИ * Яркость – произведение коэффициента молярной экстинкции и квантового выхода флуоресценции, деленое на 1000.
Молекулярная масса, кДа 27 Длина полипептидной цепи, аминокислот 239 Структура димер Агрегация в клетках нет Скорость созревания при 37°C быстрая Активирующий свет синий или зеленый (450-540 нм) Цвет флуоресценции оранжевый Максимум возбуждения, нм 512 Максимум эмиссии, нм 555 Квантовый выход 0.42 Коэффициент молярной экстинкции, M-1см-1 41 200 Яркость* 17.3
Список продуктов
| Название | Описание | Инструкция | Кат. # | Количество | Цена, руб. |
|---|---|---|---|---|---|
| pKillerOrange-C вектор | Вектор для экспрессии KillerOrange в клетках млекопитающих под контролем CMV-промотора, содержит полилинкер (MCS) на 3'- конце кодирующей последовательности KillerOrange | FP221 | 20 мкг | 17 4008 700 | |
| pKillerOrange-N вектор | Вектор для экспрессии KillerOrange в клетках млекопитающих под контролем CMV-промотора, содержит полилинкер (MCS) на 5'- конце кодирующей последовательности KillerOrange | FP222 | 20 мкг | 17 4008 700 | |
| pKillerOrange-dMito вектор | Вектор для экспрессии KillerOrange, слитого с сигналом локализации в митохондриях, в клетках млекопитающих под контролем CMV-промотора. Активация KillerOrange, локализованного в митохондриях, приводит к гибели клеток путем апоптоза | FP224 | 20 мкг | 17 4008 700 | |
| Антитела Anti-KillerRed | AB961 | 100 мкг | 12 400 |
Список литературы
- Sarkisyan KS, Zlobovskaya OA, Gorbachev DA, Bozhanova NG, Sharonov GV, Staroverov DB, Egorov ES, Ryabova AV, Solntsev KM, Mishin AS, Lukyanov KA.
KillerOrange, a Genetically Encoded Photosensitizer Activated by Blue and Green Light.
PLoS One. 2015; 10 (12):e0145287
pmid: 26679300 doi: 10.1371/journal.pone.0145287