Антитела Anti-Tag(CGY)FP
Распознают TagCFP, TagGFP, TagGFP2, TagYFP, PS-CFP2, AceGFP1, Case12, HyPer и EGFP
Вестерн-блот, иммуноблоттинг, иммуноцитохимия и ИФА
Специфические IgG кролика, очищенные аффинной хроматографией
Поликлональные антитела кролика против TagCFP, TagGFP, TagGFP2, TagYFP, PS-CFP2, AceGFP1, Case12, HyPer и EGFP.
Специфичность: антитела отобраны по способности распознавать денатурированные и нативные TagCFP, TagGFP, TagGFP2, TagYFP, PS-CFP2, AceGFP1, Case12 и HyPer. Антитела распознают также EGFP. Перекрестная реактивность с TagBFP, TurboGFP, CopGFP, PhiYellow, TurboYFP, TagRFP, TurboRFP, mKate2, TurboFP635, TurboFP650 и NirFP слабая или отсутствует.
Детекция флуоресцентных белков вестерн-блотом с антителами Anti-Tag(CGY)FP.
Лизаты клеток HEK293, экспрессирующих флуоресцентные белки, перед нанесением прогревали в буфере для образцов (95 °C, 10 мин). Концентрация антител Anti-Tag(CGY)FP — 0,2 мкг/мл. Вторичные антитела — антитела козы против IgG кролика, конъюгированные с пероксидазой хрена.
Применение
- Вестерн-блот
- Иммуноблоттинг
- Иммуноцитохимия (ICC)
- ИФА (ELISA)
Рабочие разведения:
- вестерн-блот — 1:1 000 – 1:5 000
- ИФА — 1:30 000 – 1:50 000
- иммуноцитохимия — 1:1 000 – 1:5 000
Оптимальные разведения и концентрации подбираются пользователем.
Получение
Иммуноген: полноразмерный рекомбинантный нативный TagGFP2.
Полноразмерный рекомбинантный TagGFP2 выделен из трансформированных E. coli органической экстракцией и ионообменной хроматографией.
Антитела получены иммунизацией кроликов рекомбинантным нативным TagGFP2. Специфические IgG очищены аффинной хроматографией на TagGFP2.
Форма поставки и хранение
Форма поставки: лиофилизат из буфера PBS с 0,5 % трегалозы, pH 7,4.
Восстановление: стерильной водой или 50 % глицерином до концентрации 1 мг/мл.
Транспортировка: при комнатной температуре.
Хранение:
- Лиофилизированные антитела стабильны 12 месяцев с даты получения при хранении при −20 °C. Желательно хранить с осушителем (силикагелем).
- Антитела, восстановленные стерильной водой, хранятся 3 месяца при +2…+8 °C без заметной потери активности.
- Антитела, восстановленные 50 % глицерином, хранятся 6 месяцев при −20 °C в морозильнике без автоматической разморозки без заметной потери активности.
- После восстановления разделите антитела на аликвоты, избегайте повторного замораживания и оттаивания.
Подготовка образцов
Подготовка образцов для вестерн-блота. К образцу, содержащему 10–100 нг белка-мишени, добавьте равный объем 2× буфера для образцов SDS-PAGE. Перед нанесением на гель или на мембрану (дот-блот) прогрейте образец при 95 °C.
Фиксация тканей (клеток) для иммуногистохимии. Рекомендуется фиксация формальдегидом (формалин, параформ). Например, ткань фиксируют в PBS с 4 % формальдегида 10–15 мин, обрабатывают 0,1 % сапонином в PBS 10–15 мин и трижды промывают PBS.