Прямая ПЦР (Direct PCR)

Прямая ПЦР (Direct PCR) — метод амплификации ДНК из биологического материала без предварительного выделения и очистки нуклеиновых кислот. Метод позволяет использовать образец в реакции практически сразу после получения, снижая требования к пробоподготовке и сокращая время анализа.

ПЦР с цельной крови и лейкоцитарной фракции

Direct PCR применяется для амплификации ДНК непосредственно из крови и лейкоцитарной фракции млекопитающих, минуя этап выделения и очистки ДНК.

Эффективность амплификации обеспечивается:
- InBlood ДНК-полимеразой. Фермент обладает высокой устойчивостью к ингибирующим компонентам крови, включая гемоглобин, лактоферрин, иммуноглобулины, полисахариды, фенольные соединения;
- Буфером InBlood, способствующим разрушению клеточных мембран.

Преимущества метода

• Упрощение работы с большим количеством образцов
• Сокращение времени анализа за счет исключения этапа выделения ДНК
• Уменьшение расхода реактивов и материалов, необходимых для пробоподготовки
• Снижение риска контаминации и потери образца благодаря уменьшению количества этапов работы

Способы детекции ПЦР-продукта

Амплификация с последующим анализом ПЦР-продукта с помощью гель-электрофореза:

Результат ПЦР амплификации образцов крови и лейкоцитов с помощью InBlood ДНК-полимеразы М — DNA Ladder 1 kb; (1) — кровь с ЭДТА, 10% биоматериала на реакцию; (2) — кровь с цитратом натрия, 5% биоматериала на реакцию; (3) — кровь с гепарином, 2% биоматериала на реакцию; (4) — лейкоциты из крови с ЭДТА, 4% биоматериала на реакцию; (5) — лейкоциты из крови с цитратом натрия, 4% биоматериала на реакцию; (6) — лейкоциты из крови с гепарином, 4% биоматериала на реакцию. Лейкоциты получены с помощью протокола 3 "Рекомендации по получению лейкоцитарной фракции из крови млекопитающих".

ПЦР-РВ с использованием интеркалирующего красителя SYBR Green I:

		Результат амплификации образцов крови человека с разными антикоагулянтами (ЭДТА – фиолетовым; цитрат натрия – красным; гепарин – синим) с использованием готовой смеси 5X InBlood PCRmix-HS SYBR с интеркалирующим красителем SYBR Green I. Слева представлен график амплификации; Cправа — график плавления ПЦР-продукта.

ПЦР-РВ с флуоресцентными зондами (TaqMan пробы):

		Детекция полиморфизма гена SLCO1B1 методом ПЦР-РВ в цельной крови (антикоагулянт ЭДТА) с использованием готовой смеси 5X InBlood PCRmix-HS. Слева результат амплификации Донора 1 — гомозигота по аллели 1 (флуоресценция по каналу FAM); Справа результат амплификации Донора 2 — гетерозигота (флуоресценция по каналам FAM и HEX).

Связанные продукты

ПРОДУКТ	КАТ.#	ОПИСАНИЕ НАБОРА	КОЛ-ВО	ЦЕНА, РУБ.	ИНСТРУКЦИЯ (PDF)
Цены указаны с учетом НДС. Стоимость доставки рассчитывается отдельно. Для заказов с суммой менее 10 тыс.руб. также отдельно рассчитывается стоимость оформления договора (заключается по запросу заказчика). Продукты предназначены только для научно-исследовательских целей.
InBlood ДНК-полимераза Новинка!	PK132S	Для амплификации с цельной кровью и лейкоцитами без предварительного выделения ДНК	200 р-ций по 50 мкл
	PK132L		1 000 р-ций по 50 мкл
	PK132B		НА ЗАКАЗ*
5X InBlood PCRmix-HS Новинка!	PK332S	Для ПЦР и ПЦР-РВ с цельной кровью без предварительного выделения ДНК	100
	PK332L		1 000
	PK332B		НА ЗАКАЗ*
5X InBlood PCRmix-HS SYBR Новинка!	PK333S	Для ПЦР-РВ с цельной кровью без предварительного выделения ДНК	100
	PK333L		1 000
	PK333B		НА ЗАКАЗ*