Флуоресцентные белки: группа TagFPs
 | Группа TagFPs объединяет яркие мономерные флуоресцентные белки, рекомендуемые для исследования локализации и колокализации белков в живых системах. Благодаря мономерной природе, белки этой группы идеальны для использования в качестве партнеров слияния с любыми клеточными белками, что было продемонстрировано в многочисленных модельных экспериментах. Низкая токсичность белков группы TagFPs позволяет использовать их для создания стабильно трансфецированных клеточных линий, а разнообразие цветов флуоресценции (от синего до дальне-красного) делает их удобным инструментом для многоцветного мечения клеточных структур и приложений на основе флуоресцентного резонансного переноса энергии (FRET). |
Спектральное разнообразие
 | | Нормализованные спектры возбуждения и эмиссии белков группы TagFPs. |
|---|
Таблица основных свойств белков группы TagFPs
| БЕЛОК | TagBFP | TagCFP | TagGFP2 | TagYFP | TagRFP | FusionRed | mKate2 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
|
* Яркость – произведение коэффициента молярной экстинкции и квантового выхода флуоресценции, деленое на
1000. ** Очищенный рекомбинантный белок в концентрации 10 мг/мл находится в мономером состоянии, что подтверждено методами высокоэффективной жидкостной хроматографии (HPLC). К экст. – коэффициент молярной экстинкции. | |||||||
| Цвет флуоресценции | синий | голубой | зеленый | желтый | оранжево-красный | красный | дальне-красный |
| Максимум возбуждения (нм) | 402 | 458 | 483 | 508 | 555 | 580 | 588 |
| Максимум
| 457 | 480 | 506 | 524 | 584 | 608 | 633 |
| Квантовый выход | 0.63 | 0.57 | 0.60 | 0.62 | 0.48 | 0.19 | 0.40 |
| К экст.
| 52 000 | 37 000 | 56 500 | 50 000 | 100 000 | 94 500 | 62 500 |
| Яркость* | 32.8 | 21.1 | 33.9 | 31.0 | 48.0 | 18.0 | 25.0 |
| Яркость, % от EGFP | 99 | 64 | 105 | 94 | 148 | 53 | 74 |
| Фотостабильность | высокая | высокая | высокая | высокая | средняя | высокая | высокая |
| pKa | 2.7 | 4.7 | 5.0 | 5.5 | 3.8 | 4.6 | 5.4 |
| Структура | мономер | мономер | мономер | мономер | мономер | супермономер** | мономер |
| Токсичность для клеток | нет | нет | нет | нет | нет | нет | нет |
| Агрегация | нет | нет | нет | нет | нет | нет | нет |
| Скорость созревания при 37°C | быстрая | быстрая | быстрая | быстрая | быстрая | быстрая | быстрая |
| Молекулярный вес (кДа) | 26 | 27 | 27 | 27 | 27 | 26 | 26 |
Примеры использования
Белки группы TagFPs были протестированы в качестве партнеров слияния с сигналами внутриклеточной локализации и с рядом олигомеризующихся клеточных белков, а так же при создании стабильно трансфецированных клеточных линий.
 |  | Многоцветное мечение белков и органелл в клетках HeLa с помощью TagFPs.Фотографии любезно предоставлены М. Давидсоном (США) |
|---|---|---|
 |  | Стабильно-трансфецированная клеточная линия U-205, экспрессирующая химерные белки TagRFP-α-тубулин (А) и TagYFP-β-актин (B).Фотографии любезно предоставлены К. Пецельтом (Германия) |
