Флуоресцентные белки: группа TagFPs
Группа TagFPs объединяет яркие мономерные флуоресцентные белки, рекомендуемые для исследования локализации и колокализации белков в живых системах. Благодаря мономерной природе, белки этой группы идеальны для использования в качестве партнеров слияния с любыми клеточными белками, что было продемонстрировано в многочисленных модельных экспериментах.
Низкая токсичность белков группы TagFPs позволяет использовать их для создания стабильно трансфецированных клеточных линий, а разнообразие цветов флуоресценции (от синего до дальне-красного) делает их удобным инструментом для многоцветного мечения клеточных структур и приложений на основе флуоресцентного резонансного переноса энергии (FRET).
Спектральное разнообразие
Нормализованные спектры возбуждения и эмиссии белков группы TagFPs.
Таблица основных свойств белков группы TagFPs
Белок | |||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
Цвет флуоресценции | синий | голубой | зеленый | желтый | оранжево-красный | красный | дальне-красный |
Максимум возбуждения (нм) | 402 | 458 | 483 | 508 | 555 | 580 | 588 |
Максимум эмиссии (нм) | 457 | 480 | 506 | 524 | 584 | 608 | 633 |
Квантовый выход | 0.63 | 0.57 | 0.60 | 0.62 | 0.48 | 0.19 | 0.40 |
К экст. (M-1cm-1) | 52 000 | 37 000 | 56 500 | 50 000 | 100 000 | 94 500 | 62 500 |
Яркость* | 32.8 | 21.1 | 33.9 | 31.0 | 48.0 | 18.0 | 25.0 |
Яркость, % от EGFP | 99 | 64 | 105 | 94 | 148 | 53 | 74 |
Фотостабильность | высокая | высокая | высокая | высокая | средняя | высокая | высокая |
pKa | 2.7 | 4.7 | 5.0 | 5.5 | 3.8 | 4.6 | 5.4 |
Структура | мономер | мономер | мономер | мономер | мономер | супермономер** | мономер |
Токсичность для клеток | нет | нет | нет | нет | нет | нет | нет |
Агрегация | нет | нет | нет | нет | нет | нет | нет |
Скорость созревания при 37°C | быстрая | быстрая | быстрая | быстрая | быстрая | быстрая | быстрая |
Молекулярный вес (кДа) | 26 | 27 | 27 | 27 | 27 | 26 | 26 |
* Яркость – произведение коэффициента молярной экстинкции и квантового выхода флуоресценции, деленое на 1000.
** Очищенный рекомбинантный белок в концентрации 10 мг/мл находится в мономерном состоянии, что подтверждено методами высокоэффективной жидкостной хроматографии (HPLC).
К экст. – коэффициент молярной экстинкции.
Примеры использования
Белки группы TagFPs были протестированы в качестве партнеров слияния с сигналами внутриклеточной локализации и с рядом олигомеризующихся клеточных белков, а также при создании стабильно трансфецированных клеточных линий.
Многоцветное мечение белков и органелл в клетках HeLa с помощью TagFPs.
Фотографии любезно предоставлены М. Давидсоном (США)