MycoReport

Набор для выявления контаминации микоплазмой культур клеток методом ПЦР

- Возможен анализ культуральной жидкости без выделения ДНК
- Содержит фермент УДГ для предотвращения контаминации и исключения ложноположительных результатов
- Включает контроль для выявления присутствия ингибиторов реакции
- Время анализа: от 2.5 часов

Набор реактивов MycoReport позволяет надежно проверить культуры клеток на наличие микоплазменной контаминации методом ПЦР с анализом на агарозном геле. Структура праймеров позволяет гарантированно обнаружить геномную ДНК шести видов микроорганизмов, которые составляют около 95% случаев микоплазменных инфекций культур клеток - Mycoplasma orale, M.arginini, M. fermentans, M. hominis, M. hyorhinis и Acholeplasma laidlawii. Набор подходит для регулярного скрининга клеточных линий.

Биологический материал

• Культуральная жидкость клеток
• ДНК, выделенная из культуры клеток

Для выделения ДНК из клеточных культур можно воспользоваться набором ExtractDNA Blood.

Метод

ПЦР по конечной точке – амплификация видоспецифичных участков генов 16S рРНК микроорганизмов с последующей электрофоретической детекцией.

Риск получения ложноположительных результатов снижен благодаря присутствию УДГ (урацил-ДНК-гликозилазы). Этот фермент расщепляет ПЦР-продукты, полученные в предыдущих постановках (в случае их попадания в реакционную смесь).

Риск ложноотрицательных результатов снижен благодаря наличию положительного контрольного образца (ПКО) и реакции с внутренним контролем. Реакции с ПКО позволяют убедиться в сохранности компонентов набора. Реакция с внутренним контролем показывает наличие или отсутствие ингибиторов ПЦР, которые могут быть причиной не прохождения основной реакции.

Анализ результата

Качественный анализ по наличию/отсутствию целевого ПЦР-продукта в агарозном геле, размер ампликона 516-519 п.о. (в зависимости от вида)

Пример электрофореграммы ПЦР-продуктов в агарозном геле (ТАЕ, 1% агарозы) при нанесении по 3 мкл реакционной смеси. По результатам проверки в образце из линии клеток HEK 293 выявлена контаминация микоплазмой. M – Маркер длин ДНК 100+ bp DNA Ladder; NTC – контроль без матрицы; ПКО – положительный контрольный образец; HeLa – исследуемый образец линии клеток HeLa; HEK – исследуемый образец линии клеток HEK 293; Смесь MR – cпецифическая реакция на наличие микоплазмы; Смесь МС – реакция внутреннего контроля.

Аналитическая чувствительность

• от 25 копий ДНК микоплазмы при анализе культуральной жидкости
• от 50 копий микоплазмы при анализе геномной ДНК, выделенной из культуры клеток

Количество исследуемых образцов

От 16 до 46 в зависимости от формата постановки.

ПРОДУКТ	КАТ.#	КОЛ-ВО	КОМПОНЕНТЫ НАБОРА	ЦЕНА, РУБ.	ИНСТРУКЦИЯ (PDF)
Цена действительна на территории РФ и не включает доставку, а также не включает затраты на оформление договора для заказов с суммой менее 10 тысяч рублей. Продукты предназначены только для научно-исследовательских работ. Продукты не предназначены для лечения или диагностики заболеваний.
Набор MycoReport	MR001	не менее 16 образцов	5x ПЦР-смесь MycoReport, 500 мкл 5x реактив MycoPrim, 250 мкл 5x реактив MycoControl, 250 мкл Урацил-ДНК-гликозилаза, 100 мкл Контрольная ДНК (ПКО), 50 мкл Ресуспендирующий буфер, 1.5 мл Стерильная вода, 1.8 мл

Хранение и транспортировка: –20 °С, не более 10 циклов замораживания-размораживания.
Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки 1 год со дня поставки.