Набор Myco Real-Time для выявления микоплазмы

Набор реактивов для выявления контаминации микоплазмой культур клеток методом ПЦР-РВ

Проведены валидационные испытания по стандартам European Pharmacopoeia 9.0
Снижен риск контаминации ПЦР-продуктом
Время анализа: 2.5 часа

Набор Myco Real-Time позволяет обнаружить ДНК микроорганизмов класса Mollicutes в режиме реального времени, без необходимости нанесения продуктов амплификации на гель.

Структура праймеров позволяет детектировать ДНК не менее 50 видов микроорганизмов класса Mollicutes, в т.ч. наиболее часто встречающихся в лабораторных условиях контаминантов клеточных культур: Mycoplasma orale, M. arginini, M. fermentans, M. hominis, M. hyorhinis, M. gallisepticum, M. genitalium, M. penetrans, M. pneumoniae, M. salivarium и Acholeplasma laidlawii.

Набор прошел валидационные испытания по правилам European Pharmacopoeia 9.0 (chapter 2.6.7) и рекомендациям, приведенным в международных стандартах CLSI.

Myco Real-Time может быть использован как в научных лабораториях, так и в фармацевтической практике. Например, для выявления контаминации микоплазмой в препаратах передовой терапии (ППТ, англ. ATMP) и других биомедицинских клеточных продуктах (БМКП) на основе культур клеток.

Материал для анализа

ДНК, выделенная из:

культур клеток или культуральной жидкости;
реагентов для культивирования, в т.ч. используемых в фармацевтической промышленности.

Для выделения ДНК можно воспользоваться набором ExtractDNA Blood или любым другим методом выделения и очистки геномной ДНК.

Метод

Анализ проводится методом ПЦР-РВ с зондами типа TaqMan. В каждой пробирке проходят одновременно две реакции: специфическая и внутреннего контроля.

Для определения ДНК микоплазмы проводят специфическую амплификацию фрагмента высококонсервативного участка генома, кодирующего 16S рРНК.

Реакция внутреннего контроля с искусственной ДНК-матрицей выявляет присутствие ингибиторов ПЦР.

Пример результата амплификации образцов:

А. В образце присутствует ДНК микроорганизмов класса Mollicutes
Б. Контаминация не выявлена

Красные линии - специфическая реакция на микоплазму (детекция в канале FAM).
Синие линии - реакция внутреннего контроля (детекция в канале HEX).

Совместимость с приборами ПЦР-РВ

CFX96 Touch™ Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad)
Applied Biosystems® 7500 (Thermo Fisher Scientific)
StepOne Plus™ Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
Rotor-Gene Q (Qiagen)
DTprime (ДНК-Технология)

Основные характеристики

Предел обнаружения: 2 или 4 копии генома на реакцию в зависимости от вида микоплазмы.

Специфичность: набор выявляет наличие геномной ДНК бактерий родов Mycoplasma и Acholeplasma и не выявляет ДНК бактерий родов Clostridium, Lactobacillus, Streptococcus, Escherichia, Pseudomonas, насекомых и млекопитающих.

Хранение и транспортировка: –20 °С.

Срок годности: 12 месяцев с даты поставки при соблюдении условий хранения и транспортировки.