Генетически-кодируемый биосенсор апоптоза Casper3-GR

Каспаза-3 (CASP3, CPP32, apopain, YAMA) - член семейства аспартат-специфических цистеиновых протеаз, один из основных медиаторов клеточного апоптоза [Kothakota et al., 1997]. Ее активация происходит на ранних статдиях апоптоза путем самопротеолиза и/или за счет воздействия других протеаз [Porter and Janicke, 1999].

Генетически-кодируемый флуоресцентный биосенсор Casper3-GR предназначен для мониторинга активности каспазы-3 и позволяет осуществлять раннюю детекцию каспаза-3-зависимого апоптоза в живых клетках. Casper3-GR состоит из двух флуоресцентных белков TagGFP и TagRFP, которые представляют собой эффективную пару для флуоресцентного резонансного переноса энергии (FRET)[Shcherbo et al., 2009]. TagGFP и TagRFP связаны полипептидным линкером DEVD, который опознается и специфически расщепляется каспазой-3. Расщепление линкера приводит к нарушению FRET между TagGFP и TagRFP, что выражается в уменьшении красной флуоресценции и возрастании зеленой флуоресценции клеток при возбуждении светом с длиной волны 482 нм.