Eng | Ru

Синтез и амплификация кДНК "в одной пробирке"

- Наборы с возможностью оптимизации реакционной смеси под конкретную задачу
- Готовая смесь для рутинной ОТ-ПЦР, без контроля No RT

Проведение обратной транскрипции и ПЦР в одной пробирке позволяет сократить время подготовки и проведения реакции, а также снизить вероятность контаминации за счет уменьшения количества манипуляций с образцом. Одностадийную ОТ-ПЦР чаще всего используют для одновременной обработки большого количества образцов РНК.

Наборы и смесь OneTube можно использовать для решения задач:

  • Анализ экспрессии генов,
  • Обнаружение и количественная оценка вирусов,
  • Количественная оценка РНК или ДНК и т.п.

При одноэтапной стратегии вся синтезирующаяся кДНК попадает в ПЦР и недоступна для других приложений.

Обратная транскрипция и амплификация кДНК: в одну или в две стадии?

Формат наборов OneTube RT-PCR TaqMan и OneTube RT-PCR SYBR предусматривает контроль пробы РНК на присутствие примеси геномной ДНК в реакции без ревертазы. Раздельная комплектация ревертазы и ПЦР-смеси позволяет точечную оптимизацию состава реакционной смеси в зависимости от задачи.
Готовая смесь OneTube RT-PCRmix содержит ревертазу и ПЦР-смесь в одной пробирке. Соотношение компонентов оптимально для рутинной постановки ОТ-ПЦР.

Основные свойства

  • Термостабильная ревертаза (55°С) обладает высокой процессивностью и точностью синтеза кДНК, лишена активности РНКазы H;
  • HS Taq ДНК-полимераза "с горячим стартом" обладает 5' → 3' полимеразной и экзонуклеазной активностью;
  • Все компоненты оптимизированы для длительного хранения в замороженном виде и допускают до 10 циклов размораживания;
  • Детекция накопления ПЦР-продукта происходит в режиме реального времени:
    - с использованием флуоресцентных зондов типа TaqMan (набор OneTube RT-PCR TaqMan, смесь OneTube RT-PCRmix);
    - с помощью интеркалирующего красителя (набор OneTube RT-PCR SYBR, смесь OneTube RT-PCRmix – при добавлении SYBR Green I).

Преимущества

  • Сниженная вероятность контаминации по сравнению с двухстадийным протоколом синтеза кДНК;
  • Увеличенная специфичность за счет термостабильной ревертазы и "горячего старта" амплификации;
  • В одном анализе могут определяться как РНК-, так и ДНК-мишени. При этом применяется один и тот же протокол ОТ-ПЦР;
  • Гибкость при выборе метода детекции амплифицированного продукта: флуоресцентные зонды или интеркалирующие красители;
  • Устойчивость к ингибиторам ОТ-ПЦР в концентрациях, характерных для НК, выделенных стандартными методами.

Рекомендации по использованию

  • Предназначены для использования с ген-специфичными праймерами;

   Схема вариантов расположения праймеров для анализа РНК эукариот

  • Рекомендуемая длина ампликонов – до 300 п.о.;
  • Рекомендуемое количество РНК на одну реакцию – до 300 нг.

OneTube RT-PCR TaqMan

Результат ОТ-ПЦР фрагмента гена DKC с помощью набора OneTube RT-PCR TaqMan.

Матрица – последовательные разведения тотальной РНК человека в 4 раза (от 450 нг до 110 пг на старт реакции).

А – график нарастания флуоресценции при амплификации.
Б – калибровочный график.

OneTube RT-PCR SYBR

Результат ОТ-ПЦР фрагмента гена β2M с помощью набора OneTube RT-PCR SYBR.

Матрица – последовательные разведения тотальной РНК человека в 10 раз (от 100 нг до 10 пг на старт реакции).

А – график нарастания флуоресценции при амплификации.
Б – калибровочный график.

ПРОДУКТКАТ.#РЕВЕРТАЗА И ПОЛИМЕРАЗАСПОСОБ ДЕТЕКЦИИКОЛИЧЕСТВО РЕАКЦИЙЦЕНА,
РУБ.
ИНСТРУКЦИЯ (PDF)
Цены действительны на территории Российской Федерации и не включают доставку. Цены у дистрибьюторов могут отличаться от приведенных на сайте. Продукты предназначены только для научно-исследовательских работ, осуществляемых квалифицированным персоналом. Продукты не предназначены для лечения и диагностики заболеваний.
Набор OneTube RT-PCR TaqMan SK031S    В отдельных пробирках Флуоресцентные зонды типа TaqMan 100
SK031M    500
Набор OneTube RT-PCR SYBR SK032S Интеркалирующий краситель SYBR Green I (входит в состав смеси) 100
SK032M 500
Смесь OneTube RT-PCRmix
Новинка
SK101S В одной пробирке Флуоресцентные зонды типа TaqMan или интеркалирующие красители 100
SK101M 500

Хранение и транспортировка: -20°С, не более 10 циклов замораживания.
Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки 1 год со дня поставки.

Связанные продукты

развернуть
© 2002-2020 Евроген.
Россия, Москва, ул. Миклухо-Маклая 16/10.