Eng | Ru

Флуоресцентные белки: группа TurboColors


См. также:
Лишенные промоторов
векторы для анализа
генной экспрессии

Группа TurboColors объединяет белки, обладающие высоким уровнем флуоресценции, скорость созревания которых при 37°С превосходит скорость созревания остальных флуоресцентных маркеров, доступных на рынке. Эти белки идеально подходят для анализа активности промоторов в живых клетках. Для анализа быстротечных изменений в активности промоторов мы рекомендуем использовать дестабилизированные версии флуоресцентных белков (-dest1), содержащие специфическую последовательность, обеспечивающую быструю деградацию белка в клетке.

Благодаря высокой интенсивности флуоресценции, белки группы TurboColors очень удобны для мечения клеток (например, при анализе эффективности трансфекции). Несмотря на склонность к образованию димеров, белки этой группы могут быть сшиты с сигналами внутриклеточной локализации для направления их в определенные клеточные структуры. TurboFP635 - белок, обладающий флуоресценцией в дальне-красной области спектра, рекомендуется для мечения клеток внутри целых организмов.

Спектральное разнообразие

TurboFPs excitation spectra. TurboFPs emission spectra.

Нормализованные спектры возбуждения и эмиссии белков группы TurboColors.

Увеличить

Таблица основных свойств белков группы TurboColors

БЕЛОК TurboGFPTurboYFPTurboRFPTurboFP602TurboFP635
* Яркость – произведение коэффициента молярной экстинкции и квантового выхода флуоресценции, деленое на 1000.
К экст. – коэффициент молярной экстинкции.
Цвет флуоресценциизеленыйжелтый оранжево-красный красный дальне-красный
Максимум возбуждения (нм)482 525 553 574 588
Максимум эмиссии (нм)502 538 574 602 635
Квантовый выход0.53 0.53 0.67 0.35 0.34
К экст. (M-1cm-1)70 000 105 000 92 000 74 000 65 000
Яркость*37.1 55.7 61.6 26.0 22.1
Яркость, % от EGFP112 169 187 79 67
Фотостабильность высокая высокая высокая высокая высокая
pKa5.2 5.9 4.4 4.7 5.5
Структурадимер димер димер димер димер
Токсичность для клетокнет при высоких конц. нет нет нет
Агрегациянет при высоких конц. нет нет нет
Скорость созревания при 37°Cочень быстрая очень быстрая очень быстрая быстрая очень быстрая
Молекулярный вес (кДа)26 26 26 26 26

Примеры использования

Высокая скорость созревания белков группы TurboColors приводит к более раннему возникновению флуоресцентного сигнала, что позволяет использовать эти белки для анализа активности ранних промоторов.

Скорость созревания Скорость созревания

Сравнение скорости созревания EGFP и TurboGFP в развивающемся зародыше Xenopus laevis.

Векторы для экспрессии флуоресцентных белков под контролем CMV промотора были инъецированы в анимальное поле эмбрионов на стадии двух бластомеров. Флуоресцентный сигнал TurboGFP был детектирован уже на стадии средней гаструлы, сразу после активации генной экспрессии в эмбрионах.

Данные любезно предоставлены А. Зарайским (ИБХ, Россия).

Белки группы TurboColors были протестированы в качестве партнеров слияния с сигналами внутриклеточной локализации и с рядом олигомеризующихся клеточных белков, а так же при создании стабильно трансфецированных клеточных линий.

Стабильно трансфецированные линии клеток Стабильно трансфецированные линии клеток

Стабильно трансфецированные линии клеток, экспрессирующие белки группы TurboColors.

PhiYFP(m) - варианты TurboYFP, имеющие сходные спектры флуоресценции, но несколько меньшую скорость созревания и яркость. Эти варианты не образуют агрегатов и не проявляют токсичности при высоких концентрациях. Fib - фиблилларин, peroxi - сигнал локализации в пероксисомах, mito - сигнал локализации в митохондриях

Фотографии любезно предоставлены К. Пецельтом (Германия).

© 2002-2017 Евроген.
Евроген, Москва, ул. Миклухо-Маклая 16/10.