Eng | Ru

HS Taq ДНК-полимераза

- "Горячий старт" в первом цикле денатурации
- Экзонуклеазная активность 5’ → 3’
- Размер ампликонов до 5 тыс. п.о.

HS Taq ДНК-полимераза представляет собой смесь рекомбинантного фермента Taq ДНК-полимеразы и моноклональных антител. Наличие "горячего старта" существенно повышает чувствительность и специфичность реакции по сравнению с Taq полимеразой.

Область применения

- Амплификация ДНК в рутинных аналитических исследованиях
- Мультиплексная ПЦР
- ПЦР в режиме реального времени (TaqMan, интеркалирующие красители)

HS Taq ДНК-полимераза неактивна в условиях приготовления реакционной смеси. Активация фермента происходит в течение первой денатурации. При температуре более +70 °С комплекс ДНК-полимеразы с антителом диссоциирует.

Полимераза комплектуется стандартным 10Х Taq буфером или высокоэффективным 10Х Taq Turbo буфером. При необходимости можно дополнительно заказать реакционный буфер без магния.

Длина фрагмента, который возможно амплифицировать с помощью HS Taq ДНК-полимеразы, зависит от природы и качества ДНК-матрицы. В оптимальных условиях она может достигать 5 тыс.п.о.

Амплифицированные продукты имеют на концах выступающие дезоксиаденозиновые остатки, что позволяет использовать ПЦР-продукт для клонирования в Т-векторы (pAL2-T или pKAN-T).

Основные свойства HS Taq ДНК-полимеразы

1. Быстрый "горячий старт" в первом цикле денатурации (95 °С, 5-10 сек)
2. Температурный оптимум активности 70-74 °С
3. 5’ → 3’ экзонуклеазная активность
4. Накопление продукта ПЦР происходит быстрее, по сравнению с химически модифицированными полимеразами
5. Возможность клонирования продуктов ПЦР в Т-векторы (pAL2-T или pKAN-T) за счет выступающих на концах амплифицированных фрагментов ДНК дезоксиаденозиновых остатков.

Сравнение специфичности и эффективности амплификации геномной ДНК человека с помощью Taq ДНК-полимеразы и HS Taq ДНК-полимеразы.

А - фрагмент гена KIR длиной 1600 п.о.
Б - фрагмент LINE-последовательности длиной 240 п.о.
30 циклов ПЦР, 5 нг ДНК матрицы на старт. Дорожка М – маркер 1 kb DNA Ladder.

Подбор реакционного буфера

  • Для большинства приложений ПЦР рекомендуется использовать Taq Turbo буфер (особенно в случае GC-богатых ампликонов). При необходимости оптимизировать концентрацию ионов магния в реакции, можно отдельно заказать Taq Turbo буфер без Mg2+.
  • Применение стандартного Taq буфера допустимо, если увеличение эффективности ПЦР может привести к появлению неспецифического продукта, а также для реакций, в которых условия ПЦР были ранее оптимизированы под использование Taq буфера. При необходимости можно отдельно заказать Taq буфер без Mg2+.
  • Более подробно о реакционных буферах: см. Буферы для Taq и HS Taq ДНК-полимераз.

Результат амплификации GC-богатого фрагмента плазмиды в Taq Turbo буфере (красным) и Taq буфере (зеленым).

Длина фрагмента 490 п.о. Интеркалирующий краситель EvaGreen®. На старте ПЦР использовали 5, 0.5 и 0.05 нг плазмидной ДНК, 4 технических повторности каждой точки.

Результат амплификации фрагмента гена hGAPD (211 п.о.) с использованием TaqMan зонда в Taq буфере (синим) и Taq Turbo буфере (красным).

На старте ПЦР использовали 50, 7 и 1 нг геномной ДНК.

ПРОДУКТКАТ.#КОМПОНЕНТЫ НАБОРАКОЛИЧЕСТВОЦЕНА, РУБ.ИНСТРУКЦИЯ (PDF)
Цена действительна на территории Российской Федерации и не включает доставку. Цена у дистрибьюторов может отличаться от приведенной на сайте. Продукт предназначен для научно-исследовательских работ, осуществляемых квалифицированным персоналом. Продукт не предназначен для лечения и диагностики заболеваний.
HS Taq ДНК-полимераза PK017S HS Taq ДНК-полимераза (5 ед./мкл), 100 мкл
10X Taq Turbo буфер, 1.5 мл
400 р-ций по 25 мкл 1045
PK017L HS Taq ДНК-полимераза (5 ед./мкл), 5 x 100 мкл
10X Taq Turbo буфер, 5 x 1.5 мл
2000 р-ций по 25 мкл 4980
PK017H HS Taq ДНК-полимераза (5 ед./мкл), 10 x 100 мкл
10X Taq Turbo буфер, 10 x 1.5 мл
4000 р-ций по 25 мкл 8640
PK017B HS Taq ДНК-полимераза
Реакционный буфер
НА ЗАКАЗ* 9 960 за 1 мл
HS Taq ДНК-полимераза
+ смесь dNTP
PK018 HS Taq ДНК-полимераза (5 ед./мкл), 5 x 100 мкл
10X Taq Turbo буфер, 5 x 1.5 мл
50X dNTP для ПЦР (10 мМ каждого), 5 x 200 мкл
2000 р-ций по 25 мкл 6495

* Минимальный объем полимеразы, изготавливаемый по индивидуальному заказу: 1 мл, шаг – 1 мл

Транспортировка и хранение: –20°С
Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки 1 год со дня поставки.

Возможно приобрести дополнительно

развернуть
© 2002-2018 Евроген.
Евроген, Москва, ул. Миклухо-Маклая 16/10.