Eng | Ru

Myco Real-Time

Набор реактивов для выявления контаминации микоплазмой культур клеток методом ПЦР-РВ

- Проведены валидационные испытания по стандартам European Pharmacopoeia 9.0
- Возможен анализ культуральной жидкости без выделения ДНК
- Снижен риск контаминации ПЦР-продуктом
- Время анализа: 2.5 часа

Набор Myco Real-Time позволяет обнаружить ДНК микроорганизмов класса Mollicutes в режиме реального времени, без необходимости нанесения продуктов амплификации на гель.

Структура праймеров позволяет детектировать ДНК не менее 50 видов микроорганизмов класса Mollicutes, в т.ч. наиболее часто встречающихся в лабораторных условиях контаминантов клеточных культур: Mycoplasma orale, M. arginini, M. fermentans, M. hominis, M. hyorhinis, M. gallisepticum, M. genitalium, M. penetrans, M. pneumonia, M. salivarium и Acholeplasma laidlawii.

Набор прошел валидационные испытания по правилам European Pharmacopoeia 9.0 (chapter 2.6.7) и рекомендациям, приведенным в международных стандартах CLSI.

Myco Real-Time может быть использован как в научных лабораториях, так и в фармацевтической практике. Например, для выявления контаминации микоплазмой в препаратах передовой терапии (ППТ, англ. ATMP) и других биомедицинских клеточных продуктах (БМКП) на основе культур клеток.

Материал для анализа

  • ДНК, выделенная из:
     - культур клеток или культуральной жидкости
     - реагентов для культивирования
     - лекарственных средств на основе клеточных культур
  • Культуральная жидкость (экспресс-тест)
  • Смывы с поверхностей

При культивировании клеток источником ДНК микоплазмы может быть культуральная среда, ее компоненты или сам исследователь. В случае выявления контаминации рекомендуется дополнительно проанализировать смывы с поверхностей и используемые реагенты для культивирования, в состав которых входят компоненты, получаемые из живых существ (FBS, DMEM и другие).

Для выделения ДНК можно воспользоваться набором ExtractDNA Blood или любым другим методом выделения и очистки геномной ДНК.

Метод

Анализ проводится методом ПЦР-РВ с зондами типа TaqMan. В каждой пробирке проходят одновременно две реакции: специфическая и внутреннего контроля.

Для определения ДНК микоплазмы проводят специфическую амплификацию фрагмента высококонсервативного участка генома, кодирующего 16S рРНК.

Реакция внутреннего контроля с искусственной ДНК-матрицей выявляет присутствие ингибиторов ПЦР.

Кривые накопления продукта ПЦР

Пример результата амплификации образцов:

А. В образце присутствует ДНК микроорганизмов класса Mollicutes
Б. Контаминация не выявлена

Красные линии - специфическая реакция на микоплазму (детекция в канале FAM).
Синие линии - реакция внутреннего контроля (детекция в канале HEX).

Содержит положительный контрольный образец и реагент для выявления ингибиторов

Совместимость с приборами ПЦР-РВ

  • CFX96 Touch™ Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad)
  • Applied Biosystems® 7500 (Thermo Fisher Scientific)
  • StepOne Plus™ Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
  • Rotor-Gene Q (Qiagen)
  • DTprime (ДНК-Технология)

Основные характеристики

Предел обнаружения: 2 или 4 копии генома на реакцию в зависимости от вида микоплазмы.

Специфичность: набор выявляет ДНК микроорганизмов класса Mollicutes и не детектирует ДНК насекомых, млекопитающих и ДНК родственных микоплазмам бактерий (Clostridium, Lactobacillus и Streptococcus).

ПРОДУКТКАТ.#КОЛ-ВОЦЕНА, РУБ.ИНСТРУКЦИЯ (PDF)
Цена действительна на территории Российской Федерации и не включает доставку. Цена у дистрибьюторов может отличаться от приведенной на сайте.
Продукт предназначен для научно-исследовательских работ, осуществляемых квалифицированным персоналом. Продукт не предназначен для лечения и диагностики заболеваний.
Myco Real-Time
Новинка!
MR004 50 реакций (от 8 до 23 исследуемых образцов)

Хранение и транспортировка: –20°С

Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки 1 год со дня поставки.

© 2002-2019 Евроген.
Евроген, Москва, ул. Миклухо-Маклая 16/10.