Фотосенсибилизатор KillerRed

- Генетически-кодируемый фотосенсибилизатор
- Активация зеленым или оранжевым светом

- Описание белка (pdf, англ.)
- Спектры (xls)
- Цитирование

Фотосенсибилизаторы - вещества, способные производить активные формы кислорода (АФК) при облучении светом. KillerRed и его производные (например, KillerOrange) - единственные известные сегодня генетически кодируемые фотосенсибилизаторы, которые могут быть непосредственно экспрессированы в клетках-мишенях и созревать без добавления экзогенных компонентов.

KillerRed – димерный флуоресцентный белок, обладающий красной флуоресценцией (максимумы возбуждения и эмиссии при 585 и 610 нм, соответственно). Он не проявляет токсических свойств до активации зеленым или оранжевым светом. После облучения светом с длиной волны 540-590 нм KillerRed образует АФК, которые повреждают близлежащие молекулы, и утрачивает способность к флуоресценции.

KillerRed может быть использован для избирательного светоиндуцируемого уничтожения клеток. Тип клеточной гибели зависит от внутриклеточной локализации фотосенсибилизатора, а также интенсивности и длительности облучения. В случае митохондриальной локализации фотосенсибилизатора преимущественно развивается апоптоз, в случае мембранной – некроз (Bulina et al., 2006a; 2006b).

KillerRed также может быть использован для селективной инактивации слитого с ним белка (технология CALI, chromophore-assisted light inactivation). Он может непосредственно быть слит с некоторыми белками-мишенями (например, β-актином, фибрилларином, транспортером дофамина, Tau-34 и др.). Для тех мишеней, у которых может произойти нарушение функций вследствие димеризации фотосенсибилизатора, KillerRed рекомендуется использовать в виде тандемного варианта. В таком случае он не нарушает работу слитых с ним мишеней; например, слитый с гистоном H2B тандемный вариант KillerRed (ArrestRed) позволяет влиять на клеточный цикл при облучении светом (Serebrovskaya et al., 2011).

Таблица основных свойств

KillerRed spectra

Нормализованные спектры возбуждения (зеленая линия) и испускания (красная линия) флуоресценции.

ХАРАКТЕРИСТИКИ
* Яркость – произведение коэффициента молярной экстинкции и квантового выхода флуоресценции, деленое на 1000.
Молекулярная масса, кДа 27
Длина полипептидной цепи, аминокислот 239
Структура димер
Агрегация в клетках нет
Скорость созревания при 37°C высокая
Активирующий свет зеленый или оранжевый (540-590 нм)
Цвет флуоресценции красный
Максимум возбуждения, нм 585
Максимум эмиссии, нм 610
Квантовый выход 0.25
Коэффициент молярной экстинкции, M-1см-1 45 000
Яркость* 11.3

Список продуктов

НАЗВАНИЕ КАТ.# ОПИСАНИЕ КОЛ-ВО ЦЕНА, РУБ. ТЕХНИЧЕСКАЯ ИНФОРМАЦИЯ
Цена действительна на территории РФ и не включает доставку, а также не включает затраты на оформление договора для заказов с суммой менее 10 тысяч рублей. Продукты предназначены только для научно-исследовательских работ. Продукты не предназначены для лечения или диагностики заболеваний.
Флуоресцентные белки защищены патентами компании Евроген. Используя эти продукты, вы принимаете условия Ограниченной Лицензии #001.
* При покупке нескольких векторов, кодирующих один флуоресцентный белок, на второй и последующие действует специальная цена.
pKillerRed-N вектор FP962 Вектор для экспрессии KillerRed в клетках млекопитающих под контролем CMV-промотора, содержит полилинкер (MCS) на 5'- конце кодирующей последовательности KillerRed 20 мкг
Описание (pdf, англ.)
Сиквенс (txt)
Карта рестрикции (pdf)
Таблица рестрикции (pdf)
pKillerRed-B вектор FP963 Вектор для экспрессии KillerRed в клетках прокариот 20 мкг
Описание (pdf, англ.)
Сиквенс (txt)
Карта рестрикции (pdf)
Таблица рестрикции (pdf)
pKillerRed-mem вектор FP966 Вектор для экспрессии KillerRed, слитого с сигналом локализации на мембране, в клетках млекопитающих под контролем CMV-промотора. Активация KillerRed, локализованного на мембране, приводит к гибели клеток в следствие разрушения липидного слоя. 20 мкг
Описание (pdf, англ.)
Сиквенс (txt)
Карта рестрикции (pdf)
Таблица рестрикции (pdf)
Антитела Anti-KillerRed AB961 Поликлональные антитела кролика к белкам KillerRed, KillerOrange, ArrestRed и JRed 100 мкг

Список литературы:

  • Bulina ME, Chudakov DM, Britanova OV, Yanushevich YG, Staroverov DB, Chepurnykh TV, Merzlyak EM, Shkrob MA, Lukyanov S, Lukyanov KA. A genetically encoded photosensitizer. Nat Biotechnol. 2006a; 24 (1):95-9. / pmid: 16369538
  • Bulina ME, Lukyanov KA, Britanova OV, Onichtchouk D, Lukyanov S, Chudakov DM. Chromophore-assisted light inactivation (CALI) using the phototoxic fluorescent protein KillerRed. Nat Protoc. 2006b; 1 (2):947-53. / pmid: 17406328
  • Serebrovskaya EO, Gorodnicheva TV, Ermakova GV, Solovieva EA, Sharonov GV, Zagaynova EV, Chudakov DM, Lukyanov S, Zaraisky AG, Lukyanov KA. Light-induced blockage of cell division with a chromatin-targeted phototoxic fluorescent protein. Biochem J. 2011; [Epub ahead of print]. / pmid: 21214518