Eng | Ru

    ПОИСК ПО САЙТУ

Практикум по генной инженерии

- Инструкция

Разработанный компанией Евроген практикум предназначен для студентов 3-4 курса, специализирующихся в области молекулярной биологии, генетики, вирусологии и смежных специальностей, а также для повышения профессионального уровня аспирантов и начинающих исследователей. Практикум подразумевает наличие у учащихся начального опыта работы с ДНК, полимеразной цепной реакцией и клонированием.

Практикум разбит на несколько задач, построенных таким образом, чтобы они моделировали реальное научное исследование. На примере клонирования и экспрессии гена флуоресцентного белка из кораллового полипа рода Clavularia отрабатывается ряд методов, широко применяемых в современной генной инженерии, в том числе выделение суммарной РНК, обратная транскрипция, амплификация кДНК в полимеразной цепной реакции (ПЦР), поиск и клонирование участков интересующего гена с применением вырожденных праймеров, скрининг экспрессионной библиотеки, экспрессия и очистка рекомбинантного белка.

Основные задачи практикума

Задача 1. Выделение суммарной РНК; анализ суммарной РНК на гель-электрофорезе
Задача 2. Синтез кДНК на матрице суммарной РНК
Задача 3. Идентификация 3'- и 5'-концевых фрагментов целевых транскриптов
Задача 4. Амплификация полной кодирующей последовательности гена флуоресцентного белка и его направленное клонирование в бактериальный экспрессионный вектор
Задача 5. Экспрессия гена флуоресцентного белка в бактериях E. coli, визуализация и выделение рекомбинантного белка

Задачи практикума могут быть выполнены в комплексе (по очереди) или отдельно друг от друга. При недостатке времени, оборудования и т.д. некоторые задачи могут быть исключены из программы практикума. Набор Clavularia FP cloning set (Евроген, MB001) содержит все необходимые исходные материалы (контрольные образцы), позволяющие осуществить любую из задач без выполнения предыдущих.

Если вы планируете выполнение только отдельных задач практикума, выберите необходимые вам наборы из списка продуктов и сформируйте собственный комплект реактивов.

Внимание: Кроме указанных ниже продуктов для проведение практикума необходимо наличие определенного лабораторного оборудования, расходных материалов и дополнительных реактивов.


Пожалуйста, обратите внимание:
При заказе реагента ExtractRNA (КАТ.# BC032) в компании Евроген, действуют следующие условия доставки по РФ за пределы г. Москвы

ПРОДУКТКАТ.#ВОСТРЕБО-
ВАННОСТЬ
КОМПОНЕНТЫ НАБОРАКОЛ-ВОЦЕНА, РУБ.
Цены действительны на территории Российской Федерации и не включают доставку. Цена у дистрибьюторов может отличаться от приведенной на сайте. Продукты предназначены для научно-исследовательских или учебных работ, осуществляемых квалифицированным персоналом. Продукты не предназначены для лечения и диагностики заболеваний.
Набор для практикума Clavularia FP cloning set MB001 Все задачи Ген-специфические праймеры для 3’-RACE флуоресцентного белка Clavularia: Dir1-NGH; Dir2-NFP; Dir3-WEP (10 мкМ), 50 мкл каждого
Праймеры для клонирования флуоресцентного белка: ClavFP-Dir-BamHI, ClavFP-Rev-HindIII (10 мкМ), 50 мкл каждого
Контрольная кДНК Clavularia (в 5 мМ Трис-HCl, pH 8.0), 10 мкл
Контрольная РНК Clavularia (~ 0,2 мг/мл), 10 мкл
Контрольная плазмида pQE-30-FP с геном
флуоресцентного белка (10 нг/мкл), 15 мкл
Вектор для клонирования pQE-30 (100 нг/мкл), 30 мкл
Cмесь праймеров Screen-pQE (10 мкМ каждого), 50 мкл
Вода, свободная от РНКаз, 1,8 мл
Пестик для гомогенизации образцов, 2 шт.
Для проведения практикума группой до 10 чел. 12450
Реагент ExtractRNA BC032 Задача 1 Реагент для выделения суммарной РНК из биологических образцов
на 100 выделений из 100 мг ткани 3880
Набор реактивов Mint для синтеза кДНК SK001 Задача 2 Mint ревертаза, 20мкл (200 ед./мкл)
5х Mint буфер, 80 мкл
DTT (20 мМ), 30 мкл
Смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов (10 мМ каждого), 80 мкл
PlugOligo адаптер (15 мкМ), 25 мкл
3'-праймер (10 мкМ), 25 мкл
IP смесь, 130 мкл
Контрольная тотальная РНК (0,5 мкг/мкл), 15 мкл
ПЦР праймер М1 (10 мкМ), 100 мкл
50X смесь полимераз Encyclo, 50 мкл
10X Encyclo буфер, 300 мкл
Вода, свободная от РНКаз, 1,8 мл
на 20 р-ций объемом 10 мкл 10850
Набор праймеров Mint RACE primer set SK004 Задача 3 25X Смесь праймеров Step-out primer miх1, 200 мкл
25X Смесь праймеров Step-out primer miх2, 200 мкл
25X Смесь праймеров Step-out primer miх3, 200 мкл
Контрольный 3’-праймер (10 мкМ), 25 мкл
Контрольный 5’-праймер (10 мкМ), 25 мкл
Стерильная вода, 3 x 1,5мл
на 200 р-ций объёмом 25 мкл 2500
Набор реактивов для ПЦР Encyclo Plus PCR kit PK101 Задачи 3, 4 50X смесь полимераз Encyclo, 100 мкл
10X Encyclo буфер, 600 мкл
5X Encyclo Red буфер, 1,2 мл
2X Encyclo GC буфер, 3 мл
Смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов (10 мМ каждого), 120 мкл
Вода, свободная от РНКаз, 4,5 мл
на 200 р-ций объемом 25 мкл 3900
Набор для очистки ДНК из геля и реакционных смесей Cleanup Standard BC022 Задача 4 Спин-колонки, 50 шт
Собирательные пробирки на 2 мл (без крышки), 50 шт
Связывающий раствор, 30 мл
Промывочный раствор (концентрат), 9 мл
Элюирующий раствор, 2 x 1,5 мл
на 50 процедур 3200
Набор для выделения плазмидной ДНК Plasmid Miniprep BC021 Задача 4 Спин-колонки, 50 шт
Собирательные пробирки на 2 мл (без крышки), 50 шт
РНКаза А (лиофилизированная), 1,5 мг
Ресуспендирующий раствор, 14 мл
Лизирующий раствор, 14 мл
Нейтрализующий раствор, 19 мл
Промывочный раствор (концентрат), 9 мл
Элюирующий раствор, 2 x 1,5 мл
Раствор для удаления эндотоксинов, 11 мл
на 50 процедур 3495
Комплекты
Комплект реактивов для проведения практикума по генной инженерии MBS02 Набор для практикума Clavularia FP cloning set (MB001)
Реагент ExtractRNA (BC032)
Набор реактивов Mint для синтеза кДНК (SK001)
Набор праймеров Mint RACE primer set (SK004)
Набор реактивов для ПЦР Encyclo Plus PCR kit (PK101)
Набор для очистки ДНК Cleanup Standard (BC022)
Набор для выделения плазмидной ДНК Plasmid Miniprep (BC021)
Для проведения практикума группой до 10 чел. 32880
Дополнительные реагенты
Компетентные клетки для химической трансформации CC001 Задачи 4, 5 Замороженные компетентные клетки XL1-Blue,
готовые к применению согласно стандартным протоколам
10 х 100 мкл 1650
Набор реактивов PCR control set PK104 Задачи 2-5 Контрольная ДНК-матрица (плазмида), 100 мкл
Смесь праймеров (5 мкM каждого), 100 мкл
50X смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов
(10 мМ каждого), 50 мкл
Вода, свободная от РНКаз, 2 x 1,8 мл
100 р-ций объемом 25 мкл 900

Хранение: комнатная температура / +4°С / -20°С (зависит от набора и указана на упаковке каждого набора)
Транспортировка: -20°С
Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки 1 год со дня поставки.

© 2002-2017 Евроген.
Евроген, Москва, ул. Миклухо-Маклая 16/10.